трусики женские украина

На головну

 Лабораторні методи дослідження крові, сечі у дрібних домашніх тварин - Медицина, здоров'я

1. Дослідження крові тварин

До спеціальних методів дослідження крові вдаються в тих випадках, коли необхідно і можливо встановити діагноз на рівні вивчення морфологічних характеристик клітин в мазку або зміни їх функціональних властивостей під впливом різних факторів. У першому випадку дослідження ведуть з використанням цитохімічних барвників, специфічно реагують з певними включеннями або компонентами клітин; функціональні властивості клітини визначають як відповідь на фізико-хімічні дії [6].

1.1 Правила взяття крові у тварини

Умови взяття крові та її збереження до початку лабораторних досліджень мають важливе значення при отриманні достовірних результатів. Багато в чому ці результати залежать від техніки взяття крові і використовуваних при цій інструментів. В організмі розрізняє артеріальну, венозну і капілярну кров, яка має незначні цитологічні та біохімічні відмінності. Для морфологічних досліджень користуються майже виключно капілярної кров'ю, а при біохімічних - венозної.

Капілярну кров беруть з внутрішньої поверхні вушної раковини. Шерсть на місці взяття крові вистригають, очищають місце уколу ватним тампоном, змоченим спиртом-ефіром. Укол роблять на глибину до 2 мм. Першу краплю крові стирають, тому вона містить випадкові домішки і лімфу, а наступні беруть для дослідження. Дуже важливо, щоб кров витікала з ранки без натискання на тканини, інакше вона змішується з лімфою і змінює свій клітинний і біохімічний склад. Закінчення крові можна прискорити, якщо заздалегідь прогрівати місце уколу в теплій воді або джерелом сухого тепла (фен, електролампа).

При венепункції прокол оточуючих вену тканин і стінки вен роблять в один прийом. Голки для взяття крові повинні бути з коротким зрізом і досить великим діаметром, щоб не травмувати протилежну стінку вени і не викликати пошкодження еритроцитів. Попередньо голки стерилізують кип'ятінням в 1% -му розчині бікарбонату натрію, місце вкола обробляють аналогічно отриманню капілярної крові.

При взятті крові з яремної вени голку вколюють на межі переходу верхньої третини шиї в середню. Щоб викликати достатнє наповнення вени і зменшувати її рухливість, вену здавлює в середині шиї гумовим джгутом або пальцем. При проколі вени необхідно тримати голку в руці так, щоб напрямок її співпало з лінією ходу вени і щоб зріз голки був направлений вгору, до голови. Голку вколюють під гострим кутом - в 20-30 °. При попаданні у вену з голки витікає кров.

Кров повинна стікати по стінці пробірки по уникнення руйнування еритроцитів і при необхідності негайно змішуватися з достатньою кількістю антикоагулянту.

Перед витяганням голки з вени гумовий джгут знімають, перетискають вену пальцем вище місця вкола, голку витягують, а місце вкола деякий час здавлюють тампоном для запобігання утворення гематоми. У висновку область венепункції дезінфікують настоянкою йоду і заливають Колодієм [3].

Залежно від характеру досліджень готують певну кількість пробірок. Стінки скляного посуду здатні обмінюватися іонами з кров'ю, а сліди миючих засобів та пошкоджені пробірки впливають на активність, ферментів. Це можна виключити, якщо використовувати пластмасові, пробірки одноразового користування; для деяких досліджень стінки скляних пробірок покривають шаром парафіну або силіконового масла.

В залежності від завдань дослідження аналізу піддають цільну кров, плазму або сироватку.

У цільної крові визначають морфологічні показники, а також вміст глюкози, кетонових тіл, міді, цинку, кобальту, марганцю, селену та ін., Тобто речовин, рівномірно розподілених між плазмою і еритроцитами. Для дослідження речовин, нерівномірно розподілених між клітинами і рідкою частиною крові, слід використовувати сироватку або плазму. У сироватці, наприклад, досліджують загальний білок і його фракції, залишковий азот, сечовину, вільні амінокислоти, ліпіди, холестерин, білірубін, кальцій, неорганічний фосфор, магній, йод, пов'язаний з білком (СБЙ), каротин, вітаміни, ферменти та ін. У плазмі - резервну лужність, вміст натрію, калію, неорганічного фосфору, магнію, каротину, вітамінів А, С та ін.

Для отримання проби цільної крові чи плазми її стабілізують, тобто в пробірку вносять протизгортальну речовина - антикоагулянт. Антикоагулянти краще застосовувати у вигляді розчинів.

Для отримання сироватки пробірки з кров'ю рекомендується в процесі взяття крові поміщати в термостат з температурою до 38 ° С. При масових обстеженнях тварин таким імпровізованим термостатом може бути достатня ємність з водою зазначеної температури. Після завершення робіт з узяття крові, коагульовані проби обводять тонкою спицею з нержавіючої сталі для кращого відділення сироватки і ставлять в термостат при 37-38 ° С на 1-2 години для остаточного відділення сироватки. Сироватку зливають і центрифугують 20 хвилин при 2000-3000 об / хв.

Для отримання плазми кров з антикоагулянтом центрифугують 20-30 хвилин при 2000-3000 об / хв. Плазма крові відрізняється від сироватки наявністю фібриногену.

Цільну кров, плазму і сироватку для нетривалого зберігання поміщають в холодильник (+ 2 ... + 4 ° С), тривале зберігання сироватки вимагає температури - 20 ° С.

Порушення умов зберігання проб може стати причиною похибок аналізу. В результаті тривалого стояння сироватки, над еритроцитами можуть наступити зрушення в концентрації ряду компонентів: підвищується концентрація калію, активності кислої фосфатази, амінотрансфераз, лактатдегідрогенази, гідроксібутіратдегідрогенази, знижується вміст глюкози внаслідок гликолитических процесів. При температурі близько 20 ° С в цільної крові зростає вміст аміаку, багато ферментів навіть при температурі холодильника швидко втрачають свою активність (креатинкиназа, кисла фосфатаза), в лактатдегідрогеназа, навпаки, швидше втрачає активність при низьких температурах [3].

Виниклий при взятті або зберіганні гемоліз еритроцитів призводить до підвищення концентрації калію, активності кислої фосфатази, амінотрансфераз, лактатдегідрогенази, гідроксібутіратдегідрогенази. Невміле струшування проб при перемішуванні їх вмісту або при транспортуванні також може викликати гемоліз еритроцитів.

При проведенні спеціальних досліджень потрібно уважно стежити за виконанням особливих, обумовлених в описі методик правил взяття, консервації та зберігання проб крові [5].

1.2 Визначення швидкості осідання еритроцитів (ШОЕ)

Швидкість осідання еритроцитів (ШОЕ) - неспецифічний лабораторний показник крові, що відображає співвідношення фракцій білків плазми; зміна ШОЕ може служити непрямою ознакою поточного запального або іншого патологічного процесу. Проба грунтується на здатності еритроцитів в позбавленою можливості згортання крові осідати під дією гравітації. У нормі величина ШОЕ у собак не перевищує 2-5 мм / год, а у кішок - 6-10 мм / год.

Принцип методу полягає в наступному. Питома маса еритроцитів перевищує питому масу плазми, тому вони повільно осідають на дно пробірки. Швидкість, з якою відбувається осідання еритроцитів, в основному визначається ступенем їх агрегації, тобто їх здатністю злипатися разом. Через те, що при утворенні агрегатів зменшується відношення площі поверхні частинок до їх об'єму, опір агрегатів еритроцитів тертю виявляється менше, ніж сумарний опір окремих еритроцитів, тому швидкість їх осідання збільшується. Агрегація еритроцитів головним чином залежить від їх електричних властивостей і білкового складу плазми крові. У нормі еритроцити несуть негативний заряд і відштовхуються один від одного. Ступінь агрегації (а значить і ШОЕ) підвищується при збільшенні концентрації в плазмі так званих білків гострої фази - маркерів запального процесу. В першу чергу - фібриногену, C-реактивного білка, церулоплазміну, імуноглобулінів та інших. Навпаки, ШОЕ знижується при збільшенні концентрації альбумінів.

Визначення ШОЕ проводять методом Панченкова (в капілярі). У методі Панченкова в якості антикоагулянту використовують цитрат натрію. У капіляр набирають 2,5 мкл цитрату і в той же капіляр добирають 7,5 мкл крові або в заздалегідь раскапание пробірки з цитратом додають 7,5 мкл крові, кров з цитратом перемішують в пробірці, знову набирають у капіляр і встановлюють у спеціальний штатив на 1 годину. За методом Вестергрена (у пробірці).

У градуйований на 100 поділок капіляр Панченкова набирають до мітки «Р» 5% -ий розчин цитрату натрію і переносять його на годинне скло. Потім в той же капіляр набирають двічі кров до мітки «К» і обидва рази видувають її на годинне скло. Кров, ретельно перемішану з цитратом натрію, знову набирають в капіляр до мітки «К». Капіляр ставлять в штатив строго вертикально. ШОЕ враховують через 1 годину, при необхідності через 24 години і виражають у міліметрах.

Більше ста років даний лабораторний тест застосовується для кількісного визначення інтенсивності різноманітних запальних процесів. Так, найчастіше збільшення ШОЕ пов'язане із запальними процесами, отруєннями, інфекціями, инвазиями, пухлинами, гемобластозами, крововтратою, травмами, оперативними втручаннями.

Хоча запалення і є найчастішою причиною прискорення осідання еритроцитів, збільшення ШОЕ також може обумовлюватися й іншими, в тому числі і не завжди патологічними, станами [9].

Незважаючи на свою неспецифичность визначення ШОЕ все ще є одним з найбільш популярних лабораторних тестів для встановлення факту та інтенсивності запального процесу.

1.3 Визначення вмісту гемоглобіну

Визначення вмісту гемоглобіну в крові тварин є одним з найбільш важливих і масових показників. Для визначення гемоглобіну найчастіше аналізують похідні гемоглобіну, що утворилися в процесі його окислення і приєднання до гену різних хімічних груп, що призводять до зміни валентності заліза і забарвлення розчину [3].

Для рутинних лабораторних досліджень найбільш кращі колориметрические методи, як найбільш дешеві, прості і швидкі у виконанні. Кров тварини - це нормальна суміш похідних гемоглобіну з різними спектрами поглинання. При кількісному визначенні гемоглобіну колориметричною методами виникає проблема у виборі реагенту, який перетворював би всі похідні гемоглобіну тільки в одну форму перед фотометричним аналізом. Кращими методами, кількісно перетворюють гемоглобін в його похідні, виявилися геміглобінціанідним (HbCN), геміхромний (HbChr) і геміглобіназідний (HbN3), які при фотометрірованія дають найменшу похибку визначення серед інших методів аналізу [1].

Підвищення: деякі форми гемобластозів, зокрема еритремія, зневоднення організму.

Пониження (анемія): різні види анемій, у тому числі внаслідок крововтрати.

Прінцін геміглобінціанідним методу заснований на переведення всіх форм гемоглобіну в одну - гемиглобинцианида. Переклад гемоглобіну в гемиглобинцианида здійснюється при його взаємодії з трансформирующим розчином, що містить феррицианида калію, ціанід калію, дігидрофосфат калію і неіонний детергент. Дигідрофосфат калію підтримує рівень рН, при якому реакція проходить за 3-5 хвилин. Детергент підсилює гемоліз еритроцитів і запобігає мутність, пов'язану з білками плазми. Феррицианида калію окисляє всі форми гемоглобіну в метгемоглобін, який утворює з ціаністим калієм гемиглобинцианида, що має червонуватий колір, інтенсивність забарвлення якого прямо пропорційна концентрації гемоглобіну в пробі.

Принцип геміхромного методу заснований на переведення всіх форм гемоглобіну в одну - геміхром. При взаємодії гемоглобіну з трансформирующим розчином, що містить жирні кислоти з феррицианида калію або додецилсульфат натрію, відбувається його перетворення в окислених нізкоспіновую форму - геміхром (HbChr), що має червонуватий колір, інтенсивність забарвлення якого прямо пропорційна концентрації гемоглобіну в пробі.

При широкомасштабних випробуваннях геміхромного методу було показано, що в інтервалі концентрацій гемоглобіну від 40 до 200 г. / л калібрувальні графіки гемиглобинцианида і геміхрома становлять пряму лінію, що виходить з початку координат, а близькі кути нахилу прямих вказують на порівнянність обох методів.

При визначенні гемоглобіну двома методами Ахрем А.А. зі співавторами показали, що більшу точність (і меншу s) дає геміхромний метод. Автори припускають, що SDS сприяє солюбилизации мембранних частинок і перешкоджає адсорбції білка на склі пробірок і кювет, тим самим забезпечується висока точність аналізу [7].

Порівняльна оцінка результатів визначення гемоглобіну в крові двома методами показала, що результати порівнянні, а коефіцієнт кореляції методів складає 0,99. Таким чином, геміхромний метод визначення гемоглобіну в крові має всі переваги геміглобінціанідним методу, які доповнюються відсутністю у складі трансформирующего реагенту високотоксичних ціанідів та інших отруйних речовин.

Виконання. У сухі чисті пробірки дозатором внести по 5 мл трансформуючого розчину, до них долити по 20 мкл крові повіреною піпеткою Салі або механічним дозатором з усіма пересторогами, перерахованими в попередньому розділі. Пробу ретельно перемішати на мікровстряхівателе або вручну до досягнення гомогенного розчину. Розчини витримати при кімнатній температурі час, вказаний в інструкції до набору, і виміряти оптичну щільність розчинів на поверенном, каліброваному приладі в кюветі, що має нульове поглинання дистильованої води відносно аналогічної контрольної (з довжиною оптичного шляху 10 мм). Забарвлення розчинів стійка до 5:00 і більше, що дозволяє проводити вимірювання в будь-який зручний час у цьому часовому інтервалі. Розрахунок вмісту гемоглобіну в крові призвести за калібрувальним графіком або фактору, визначеного на даному приладі. Якщо дотримані всі перераховані умови підготовки та проведення аналізу, описані вище, похибка визначення гемоглобіну в крові не перевищуватиме ± 2%. Коротко підсумовуємо джерела можливих помилок при визначенні гемоглобіну: використання некаліброваних піпеток і недосконала техніка дозування проб крові; застосування неповірених обладнання, що не забезпечує лінійну залежність оптичної щільності від концентрації гемоглобіну в необхідній області вимірювань; нестабільність приладу; відсутність внутрішньолабораторного контролю якості; недостатня чистота кювет, особливо проточних; помилки при побудові калібрувальних графіків і розрахунку факторів; використання контрольних розчинів гемоглобіну низької якості; помилки оператора, помилки, що допускаються на преаналітичного фазі [6].

1.4 Кількісні характеристики клітин крові

Визначення кількості клітин крові проводиться різними методами: за допомогою рахункових камер, в мазках крові (підрахунок тромбоцитів на певну кількість еритроцитів), за допомогою автоматичних пристроїв. У всіх випадках результати представляються у вигляді кількості клітин в одиниці об'єму крові. За міжнародною системою одиниць (СІ) число формених елементів в крові виражають у розрахунку на 1 л [2].

Підрахунок клітин за допомогою рахункових камер є найбільш поширеним мікроскопічним методом. Він заснований на використанні розлученою крові, внесеної до лічильну камеру. Всі формені моменти підраховується за єдиним принципом, відмінність полягає в ступені розведення крові та застосування, різних за складом розріджувачів для еритроцитів, лейкоцитів і тромбоцитів.

Використання рахункових камер робить метод досить трудомістким для лабораторних досліджень. На точності методу позначається помилки при взятті крові, розведенні її, нерівномірності заповнення камер, порушення правил підготовки камер до роботи і підрахунку клітин. Метод вимагає великого і постійної напруги при роботі з мікроскопом і особливо обтяжливий при підрахунку еритроцитів і тромбоцитів. У той же час камерний метод може бути застосований в будь-яких умовах, не вимагає складного обладнання та дефіцитних реактивів [8].

Підрахунок тромбоцитів в мазках крові пояснюється їх малими розмірами і недостатньою чіткістю контурів при підрахунку в рахунковій камері. Тромбоцити вважаються на певну кількість еритроцитів у мазку (частіше на 1000 еритроцитів) з наступним перерахунком на 1 л крові.

Використання фотометричних або кондуктометричних принципів дозволило створити автоматичні лічильники та гематологічні автомати для лабораторних досліджень. Формені елементи крові або перекривають світловий промінь спеціального скануючого мікроскопа, або змінюють опір між електродами капіляра, по якому протікає розбавлена ??кров, при цьому виникає імпульс, реєстрований рахунковим пристроєм [2].

Гематологічні лічильники та автомати значно підвищують продуктивність праці і точність досліджень, дозволяють визначати паралельно 7-8 параметрів. У той же час висока вартість таких апаратів, спеціальні вимоги до якості реактивів, висока продуктивність і жорсткість програм роблять рентабельним їх використання лише в умовах великих лабораторій і стаціонарів.

Кількість еритроцитів і лейкоцитів у крові здорових тварин коливається в широких межах (табл. 1.4).

Таблиця 1.4. Загальний аналіз крові

 Гемоглобін% Еритроцити, млн. / Мкл Кольоровий показник Лейкоцити, тис. / Мкл Лейкограма

 Б Е М Ю П С Л Мо

 Собаки

 120 - 180

 5,0 - 8,0

 0,9 - 1,1

 8 - 17

 0-1

 2-10

-

-

 1-3

 43-71

 12-30

 3-10

 Кішки 90 - 167 5,2 - 10,9 0,9 - 1,1 4 - 17 0-1 2-12 - - 3-6 40-45 20-55 1-4

 ШОЕ собаки 2-5 мм / год; ШОЕ кішки 6-10 мм / год

Зменшення числа еритроцитів нижче нормативних показників є одним з основних лабораторних симптомів недокрів'я (анемії) [5]. Необхідно відзначити, що при анеміях не завжди спостерігається зменшення кількості еритроцитів у крові, т. К. Анемія - це зменшення концентрації гемоглобіну в одиниці об'єму і, отже, при нормальній кількості еритроцитів можливе зниження концентрації в них гемоглобіну. Для уточнення характеру анемії, крім анамнезу і клінічних даних, необхідні відомості про кількість еритроцитів, концентрації гемоглобіну, величиною гематокриту, кількості ретикулоцитів, розрахункових індексах еритроцитів, морфології еритроцитів, їх обсязі і діаметрі [8].

Збільшення числа еритроцитів (еритроцитоз, полицитемия) може спостерігатися при зменшенні об'єму циркулюючої плазми (гемоконцентраціонний, відносний еритроцитоз), а також при активації еритропоезу (абсолютний еритроцитоз) [2].

1.5 Визначення часу згортання крові за способом Бюркера

На годинне скло наносять краплю прокип'яченої дистильованої води і до неї додають краплю крові, здобуту уколом з м'якоті пальця (слід взяти другу краплю, так як до першої домішується тканинна рідина, уповільнююча згортання). Точно зазначається час взяття крові. Тонкою скляною паличкою змішують обидві краплі. Потім годинне скло поміщають в чашку Петрі, на дні якої лежить шматочок змоченою водою фільтрувального паперу; чашка Петрі грає роль вологої камери. Найкраще проводити дослідження при температурі 25 ° С. Кожні півхвилини до краю краплі приставляють тоненький кінчик витягнутої в нитку скляної палички, просувають до центру краплі і, зробивши всередині краплі кілька все більш збільшуються спіральних завитків від центру до периферії, виймають потім з краплі. Кожен раз паличку миють і ретельно витирають насухо. Початком згортання вважається той момент, коли слідом за вийнятим з крові кінчиком скляної палички потягнеться нитка фібрину. У нормі це відбувається через 5-9 хв після взяття краплі крові [4].

2. Дослідження сечі тварин

Дослідження сечі є найважливішою процедурою для характеристики загального стану здоров'я пацієнта і, особливо, ниркової функції. У складі діагностичного плану аналіз сечі надає допомогу лікаря-практику в ідентифікації найрізноманітніших системних захворювань. Незважаючи на всю простоту виконання, аналіз сечі часто проводиться неправильно, а отримані результати помилково інтерпретуються. Тому необхідно твердо дотримуватися принципу гарантії якості, а результати хімічного дослідження сечі і осаду необхідно інтерпретувати в поєднанні зі значеннями питомої ваги.

Метаболічні функції нирок відіграють важливу роль для життя, але сеча є продуктом ниркової діяльності, доступним для простого, недорогого і швидкого аналізу. Клінічний аналіз сечі включає в себе оцінку фізичних і хімічних характеристик сечі: аналіз містяться в сечі твердих речовин, інших розчинених речовин і мікроскопічне дослідження осаду сечі [4].

2.1 Правила взяття сечі у тварини

дослідження кров сеча тварина

Існує три звичайних методу збору сечі, а саме, прокол сечового міхура, катетеризація і збір сечі, що виділяється з організму природним шляхом. Вибір методу впливає на результати аналізу. Останні два з перерахованих вище методів більшою мірою схильні до ризику бактеріального зараження в порівнянні з перфорацією сечового міхура. Виділяється з організму природним шляхом сеча також відображає зміни, що відбулися як в нирках, так і в нижніх відділах сечостатевих шляхів.

Методика підготовки тварини залежить від методу відбору проб сечі. Уретральна катетеризація пов'язана з найбільшим ризиком бактеріального зараження. Для проведення катетеризації потрібно асептична методика, включаючи використання стерильного катетера. Для зниження можливості бактеріального зараження деякі практикуючі лікарі після збору сечі проводять інфузію антибіотичних засобів в сечовий міхур. Відсутність необхідної кваліфікації для проведення катетеризації маленьких собак може бути причиною, по якій багато практикуючі лікарі не проводять дослідження сечі.

Прокол сечового міхура - це більш кращий метод збору сечі. Перевага цього методу полягає в тому, що інтерпретація результатів аналізу сечі обмежується нирками і сечовим міхуром. Крім того, методика перфорації сечового міхура при приготуванні бактеріальної культури сечі дозволяє уникнути зараження зразка флорою нижніх відділів сечостатевих шляхів. Прокол сечового міхура можна проводити у пацієнтів всіх розмірів. Для цієї процедури не потрібно особливої ??кваліфікації, і вона не пов'язана з високим ризиком бактеріального зараження пацієнтів, схильних до циститу, що приводить до таких захворювань як несептичною уролітіаз (сечокам'яна хвороба).

Незручністю методу проколу сечового міхура є забруднення зразка кров'ю, що виділяється при проходженні голки через стінку органа. Цього можна уникнути шляхом застосування потрійного клапана і відкидання перших кількох мілілітрів сечі, забрудненою вмістом голки. У тварин з підозрою на гематурію слід проводити аналіз проб сечі, що виділяється з організму природним шляхом, та проб сечі, отриманих методом проколу сечового міхура. Метод проколу сечового міхура повинен використовуватися тільки тоді, коли сечовий міхур промацується і містить сечу.

Методика отримання зразка сечі шляхом природного сечовипускання увазі певну підготовку тварини. Проба, узята в середині процесу сечовипускання, характеризується меншим ризиком бактеріального зараження, що виникає внаслідок контакту сечі з ділянками навколо зовнішнього отвору і кінцевих відділів сечівника [4].

2.2 Фізична та візуальна оцінка

Фізичні характеристики включають в себе вимірювання об'єму, фіксування кольору, прозорості або каламутності, а також питомої ваги (SpG) сечі. За винятком питомої ваги, всі перераховані вище характеристики встановлюються візуально. Об'єм сечі, утвореною за даний період часу, - це ще одне джерело інформації про ниркової функції. Побічна визначення стану гідратації і питомої ваги сечі є найбільш чутливими індикаторами стану ниркової функції при проведенні клінічного аналізу сечі. Значення питомої ваги (SpG) сечі, рівне приблизно 1,010 ізостенуріческого гломерулярного фільтрату, є показником здатності нирок зберігати або виділяти воду. У пацієнтів з нормальною ступенем гідратації з низьким або нормальним рівнем вмісту азоту сечовини в плазмі та ступенем ізостенурія нирки функціонують нормально, секретуючи воду. У зневоднених, які страждають гіперазотемією з ізостенурією пацієнтів ниркова функція, мабуть, поставлено під загрозу. Питання про те, чи є дана зміна первинної або вторинної дисфункцією, вирішується шляхом докладного ознайомлення з клінічної історією захворювання, записами терапевта і проведення додаткових лабораторних досліджень або повторного аналізу сечі. Підвищений мочеобразованіе з низькими значеннями питомої ваги має місце при первинній ниркової недостатності і вторинних порушеннях, таких як цукровий діабет, Піометра (скупчення гною в порожнині матки) і гиперкортицизм (гіперфункція кори надниркових залоз), а також при використанні терапевтичних діуретиків і кортикостероїдів [2].

Нормальна сеча кішок і собак безбарвна або має світло-жовте забарвлення залежно від співвідношення в сечі розчинених речовин і розчинника. Темніший колір нормальної сечі є показником високої концентрації розчиненого в сечі урохрома, а, отже, і більш високих значень питомої ваги (SpG). Темно-жовта сеча містить високу концентрацію урохромом, а, отже, характеризується так само високими значеннями SpG. При тривалих тренуваннях контрольних запряжних і мисливських собак їхні тренери судять про стан гідратації собак за кольором їх сечі. Патологічні стани, дієта і прийом лікарських препаратів (наприклад, сульфамідних препаратів) можуть змінювати колір сечі. Якщо сеча має рожевий, червоний, коричневий або чорний колір, це вказує на гемоглобинурию або міоглобінурію при міолізісе. Блакитна або зелене забарвлення сечі дозволяє припустити білірубінурія. Забарвлення зберігається сечі поступово змінюється від темно-жовтого до темно-зеленого кольору внаслідок окислення білірубіну і уробіліногену до биливердина і уробилина, відповідно [6].

Каламутність свіжозібраної сечі є ознакою наявності в сечі суспендованих епітеліальних клітин, крові, лейкоцитів і бактерій. Охолодження свіжозібраної, концентрованої прозорою сечі до кімнатної температури або охолодження в холодильнику призводить до помутніння проби сечі, оскільки розчинність висококонцентрованих сечових солей знижується, і вони випадають в осад. При дослідженні каламутній сечі під мікроскопом видно кристали фосфату. Тому перед проведенням дослідження сечі необхідно довести температуру зразка сечі до значень кімнатної температури [1].

2.3 Хімічний аналіз сечі

Значення питомої ваги сечі має велике значення для інтерпретації результатів хімічного аналізу і досліджень осаду. Багато пацієнтів споживають постійна кількість твердої їжі, але воду можуть отримувати за бажанням. Це призводить зазвичай до широкого діапазону відмінностей між значеннями очищення води в нирках і, в свою чергу, розбавленню різних розчинених у сечі речовин. Таким чином, як показують результати хімічного аналізу сечі, кількість виведеної води надає більший вплив на концентрацію розчинених речовин або осаду, ніж на загальну кількість утвореного специфічного розчиненої речовини. Наприклад, сеча, питома вага якої становить 1,020, містить вдвічі більш високу концентрацію розчиненої речовини в порівнянні з сечею, питома вага якої становить 1,010. Сеча з питомою вагою 1,030 містить втричі вищу концентрацію розчиненої речовини в порівнянні з сечею, питома вага якої дорівнює 1,010. Таким чином, протеїнурія 1+ в сечі з питомою вагою 1,010 - це те ж саме кількість білка, що і 2+ при значенні питомої ваги 1,020 або 3+ при 1,030.

Для проведення аналізу сечі можна використовувати найрізноманітніші випускаються промисловістю індикаторні паперові смужки. Деякі можуть використовуватися для здійснення більшого числа тестів, ніж інші, але не всі тести застосовні до ветеринарній практиці. Звичайний ветеринарний аналіз сечі включає в себе визначення значення рН, вмісту білків, глюкози, кетонів, білірубіну і крові в сечі.

Методика використання сухих реактивів у процедурі із застосуванням вимірювального стрижня зручна, але часто застосовується неправильно. Кожен окремий тампон з реагентами на паличці містить напівкількісний хімічний колориметричний зразок, який при контакті з сечею протягом певного періоду часу має пройти візуальну класифікацію за кольором. Для забезпечення стабільності реактивів необхідно строго враховувати час закінчення терміну зберігання реактивів. Сонячні промені, волога середу і тепло прискорюють процес псування хімічного реактиву. Надійні результати можуть бути отримані тільки при твердому дотриманні в кожному тесті відповідного інкубаційного періоду. Особливу інформацію про зразки можна отримати, вивчивши вкладиш, який додається до упаковки виробником. Звичайна практика виймання вимірювальних стрижнів з бутля призводить до абсорбції сухими реагентами вологи з повітря і до їх псування.

Зразки поділяються на такі класи і виражаються в наступних одиницях: 0, сліди, 1+, 2+, 3+, і 4+ або в мг / дл. Здатність класифікувати за кольором у різних людей сильно розрізняється; люди з колірною ахроматопсія стикаються з труднощами в класифікуванні змін кольору. Краще користуватися методикою фіксування результатів за допомогою шкали від 0 до 4+, ніж, висловлюючи зміни кольору в одиницях мг / дл, оскільки перший спосіб підтримує напівкількісний характер даного аналізу, в той час як останній створює помилкове відчуття упевненості в чутливості, даної процедури [1 ].

Білки. Результати аналізу білків сечі повинні інтерпретуватися на базі значень питомої ваги. Протенурія 1+ у собак з питомою вагою сечі SpG більш 1,035 є нормою, тоді як стійке значення 1+ білків з SpG менш 1,035 потребує подальших досліджень. У відсутність гематурії / пиурии (наявності гною в сечі) походження стійкої протеїнурії пов'язано: з підвищеним вмістом гломерулярні-відфільтрованого альбуміну, обумовленим підвищеним гідростатичним тиском, гломерулонефритом або гломерулярні амілоїдозом (амілоїдних дистрофією); порушенням механізму абсорбції в ниркових канальцях (в основному з м'якою протеїнурією) при хронічному інтерстиціальному (межуточном) нефриті або вродженої панцитопенією (анемією або синдромом Фанконі); з підвищенням гломерулярной екскреції білків, пов'язаної з незлоякісної і злоякісної гіперглобулінемією, включаючи миелому клітин плазми, при якій виводиться білок Бенс-Джонса. Інші причини протеїнурії включають в себе стрес, гарячковий стан, фізичне навантаження і гіпертермію (перегрівання організму).

У ветеринарній лабораторії повинні проводитися як колориметрические, так і нефелометрические дослідження (тобто тест на преципитацию з сульфосалициловой кислотою - APT). При проведенні процедури визначення білків за допомогою вимірювального стрижня застосовується колірний індикатор тетрабромфенол, який при значенні pH 3 змінює колір від жовтого до синього. Результати виражаються в балах: сліди, 1+, 2+, 3+ або 4+. Будучи надійним для визначення альбуміну, метод визначення білків за допомогою вимірювального стержня, не визначає глобуліни або білки Бенс-Джонса при множинної мієломі. Помилково-позитивні результати - це звичайне явище, яке обумовлене виснаженням буферности реагентного тампона внаслідок тривалого контакту реактиву з високо-буферної, лужної або забрудненій (антисептиками, такими як хлоргексін або детергентні речовини) сечею. Помилково-позитивні результати настільки часто виходять, що необхідно підтверджувати всі позитивні результати аналізу білків із застосуванням вимірювального стрижня за допомогою тесту APT (рис. 2.3.) Нефелометрічеському дослідження APT являє собою дуже просту процедуру, при якій помутніння, що виникає в результаті змішування рівних частин сечі і розчину сульфосаліцилової кислоти, оцінюється за шкалою: 0, сліди, 1+, 2+, 3+ і 4+. Дана кислота відноситься до розряду слабких кислот, безпечна при зберіганні, при роботі з нею користуються тими ж інструментами, що і вимірювальний стрижень, вона продається у формі таблеток, які можна розчинити в певному об'ємі води [1] .Для проведення цього тесту потрібно 5% розчин сульфосалициловой кислоти. Тест здійснюється шляхом змішування рівних частин сечі і даного розчину. Зліва направо: негативний білок у сечі, 2+ білок, який характеризується певною мутностью, і 4+ білок, який виявляється у вигляді осаду.

Значення pH. рН сечі собак і кішок варіюють між 5,5 і 7. Значення pH змінюються залежно від дієти: тварини, яких утримують на дієті з високим вмістом м'яса, схильні мати кислу сечу внаслідок виведення із сечею великої кількості сульфатних і фосфатних солей, тоді як сеча тварин, що утримуються на дієтах багатих овочами, має лужне середовище. Транзиторне зниження кислотності сечі після прийому їжі супроводжується підвищенням значення pH сечі. Деякі бактерії, що населяють сечові шляхи, мають здатність розщеплювати сечу з формуванням аміак-утворюючої лужної сечі. У цих випадках зміна або відсутність змін pH може свідчити про успішну чи неуспішною терапії, або про рецидив інфекції сечових шляхів.

Глюкоза. Глюкоза, яка має велике значення для життя, добре зберігається в організмі і відсутня в сечі нормальних тварин. Будь глюкозурия повинна пройти ретельну оцінку з метою з'ясування, чи носить вона стійкий, періодичний або тимчасовий характер. Наявність глюкози в сечі відображає акумулятивний кліренс глюкози нирками за певний період часу, тоді як значення вмісту глюкози в крові знаходяться в динамічному стані і характеризують вміст глюкози в крові в даній точці в даний момент часу. Періодична і тимчасова форми глюкозурии пов'язані з більш високими значеннями вмісту глюкози в крові, ніж при порогової тимчасової гіпоглікемії (приблизно 180 мг / дл), яка виникає після прийому їжі.

Тимчасова фізіологічна глюкозурія, викликана стресом, більш яскраво виражена у кішок, ніж у собак, і може бути причиною транзиторною глюкозурии. Ця транзиторна глюкозурія часто проявляється у формі еуглікеміі, якщо дана тварина перенесло якийсь стрес, приміром, було збито машиною за кілька годин до того, як були взяті проби сечі і крові. Патологічна глюкозурия цукрового діабету супроводжується стійкою гіперглікемією. При преддіабетом має місце переміжна глюкозурія при стійкому нормальному вмісті глюкози в плазмі [1].

У собак і кішок періодична або транзиторна гіперглікемія і глюкозурія є звичайними явищами при преддіабетом, що виникає після прийому їжі, преддіабетом, який лікується стероїдами, і преддіабетом зі стрес-індукованої печінкової глікогенолітіческой транзиторною гіперглікемією, викликаної травмою. Самовільний і терапевтичний гиперкортицизм вказує на наявність переддіабетичного стану. Перед тим, як відхилити діагноз перемежающейся глюкозурии як транзиторного захворювання, необхідно виключити діагноз преддиабета або на підставі історії стресу, або шляхом вимірювання рівня глюкози в плазмі через дві години після годування. Глюкозурія ослабленою реабсорбції в ниркових канальцях зустрічається рідко і зазвичай супроводжується помірною протеїнурією синдрому Фальконі (собаки Basenji) або проявляється у формі придбаної дисфункції ниркових канальців у пацієнтів, які страждають від аміноглікозидного отруєння [4].

Білірубін. Білірубінурія часто спостерігається в концентрованій сечі нормальних собак, але не виявляється у кішок і у більшості інших видів. В результаті того, що в нормі у собак має місце низький критичний рівень екскреції білірубіну, білірубінурія від слідів до 1+ вважається нормою при дослідженні методом вимірювальних стрижнів. У сечі міститься тільки зв'язаний білірубін. Гіпербілірубінурія виявляється при захворюванні печінки, непрохідності жовчних проток, жовчнокам'яної хвороби (холелітіазі) і гемолізісе. У собак важка форма білірубінурія передує гіпербілірубінеміческая гепатопатии. У собак з важкою формою гемоглобінемії, що супроводжує внутрішньосудинний гемолізіс, походження деякої кількості сечового білірубіну може бути обумовлено билирубином, пов'язаним нирками і печінкою.

При білірубінурія використовується інша процедура, результати якої слід інтерпретувати на базі значень концентрації сечі (тобто її питомої ваги). Необхідно використовувати свіжозібране проби сечі, оскільки білірубін поступово окислюється до биливердина [1].

2.4 Мікроскопічне дослідження сечі

Клітини в сечі. При дослідженні осаду сечі в нормі виявляються 0-3 в полі зору лейкоцитів, 0-3 в полі зору еритроцитів. Підвищена кількість лейкоцитів у сечі називається пиурией, свідчить про запалення. Пиурия часто обумовлена ??бактеріальною інфекцією. Поява великої кількості еритроцитів в сечі називається гематурією. Частою причиною появи крові в сечі є уролита.

Епітеліальні клітини в сечовому осаді мають різне походження, їх злущування відбувається з органів, покритих різними видами епітелію (плоского епітелію, перехідного епітелію, ниркового епітелію). Невелика кількість епітеліальних клітин у сечі є нормою, майже завжди в сечовому осаді зустрічаються клітини плоского епітелію і перехідного епітелію. Клітини плоского епітелію, що потрапляють в сечу з піхви, зовнішніх статевих органів і сечовипускального каналу особливого діагностичного значення не мають. Перехідний епітелій вистилає слизову сечового міхура, сечоводів, ниркових мисок, великих проток передміхурової залози. Підвищена кількість клітин перехідного епітелію може бути пов'язано з запальним процесом, інтоксикаціях, сечокам'яної хвороби або пухлиною сечових шляхів. При виявленні в осаді сечі конгломератів і пластів епітеліальних клітин, помірно або значно різняться за величиною і структур, необхідно подальше дослідження для визначення можливої ??злоякісності цих клітин. Тоді з краплі осаду сечі роблять мазок для цитологічного дослідження. Поодинокі в препараті клітини ниркового епітелію на тлі нормальної мікроскопічної картини сечового осаду не дають підстави говорити про патологію. Клітини ниркового епітелію можна виявити в сечовому осаді при ураженні паренхіми нирок, інтоксикаціях, розладах кровообігу. Виявлення клітин ниркового епітелію разом з циліндрами говорить нам про важкому ураженні нирок [5].

Циліндри в сечі. Являють собою білкові або клітинні освіти канальцевого походження, що мають циліндричну форму і різну величину. У сечовому осаді розрізняють гіалінові, зернисті, воскоподібні, епітеліальні, еритроцитарні, лейкоцитарні, пігментні циліндри. У нормальній сечі тварин можна зустріти гіалінові циліндри 1-2 в препараті. Цилиндрурия є симптомом ураження нирок.

Кристалурія в сечі. У кислому сечі осідають кристали оксалатів, сечової кислоти, аморфних уратів, ксантина, цистину, в лужній сечі кристали струвита, аморфні фосфати, карбонати. За зовнішнім виглядом кристалів при мікроскопії осаду сечі можна отримати тільки дуже невизначену інформацію, це недосконала методика, оскільки зовнішній вигляд кристалів змінюється під впливом численних факторів, для точної ідентифікації потрібні складні спеціальні аналізи. При ідентифікації кристалів потрібно точно знати РН сечі, і не забувати, що кристали можуть сильно відрізнятися за формою. Кристалурія не є синонімом діагностики уролітіазу у тварини, і не є єдиним критерієм оцінки складу каменю при наявності уролітов. Навіть якщо у тварини з уролітіазом спостерігається кристалурія, зовсім необов'язково, що уролита утворені з тих же мінералів, що і кристали, вони можуть становити лише частину уролітов. І у тварини з кристаллурией не завжди утворюються уролита. Найбільш часто зустрічаються кристали в сечі кішок і собак.

Струвіти (трипельфосфатов) являють собою трьох - шести-, восьмигранні призми, іноді з'єднуються в структури типу листа папороті, Утворюються струвіти в лужній сечі (додаток 2) [1].

2.5 Дослідження сечового осаду

Для дослідження сечового осаду можна провести центрифугування 5 або 10 мл сечі при низьких швидкостях центрифугування (приблизно 2000 оборотів в хвилину) протягом п'яти хвилин. Дослідження сечового осаду можна проводити як у вологому стані, так і в сухому стані. Препарати сечового осаду можуть бути як пофарбованими, так і незабарвленими. Необхідно дати характеристику кристалів на вологих препаратах. Фарбування препаратів осаду збільшує можливості візуалізації клітинних елементів. Методом фарбування віддається перевага тими, у кого немає достатньо великого досвіду проведення аналізу сечі.

Для дослідження вологих препаратів сечі існує цілий ряд вироблених в промисловості барвників (барвник Штейнгеймера-Мальбіма, новий метиленовий синій, барвник Райта). Барвники судан III або судан IV використовуються для зорового спостереження ліпідів. Для проведення дослідження вологих препаратів крапля ресуспендованого в приблизно 0,5 мл сечі осаду поміщається на предметне скло і накривається покривним склом. Препарат досліджується під мікроскопом, спочатку при малих збільшеннях (100 Х) для сканування сечових циліндрів, а потім при великих збільшеннях (400 Х) для напівкількісного аналізу епітеліальних клітин, червоних кров'яних тілець, білих клітин крові, мікроорганізмів, кристалів та інших елементів (крапельок жиру , сперматозоїдів). Для кожного елемента фіксується середня кількість, виявлене при огляді десяти полів зору мікроскопа. Методи забарвлення за Грамом і Райту використовуються для приготування міцно забарвлених сухих препаратів. Хоча забарвлення по Граму використовується для класифікації бактерій, має місце зміна кольору пофарбованого препарату в разі присутності в сечі мертвих бактерій і бактерій у виділеннях. Хоча характеристики класифікації бактерій з використанням фарбування по ГИМС не збігаються з характеристиками фарбування по Граму, барвник ГИМС добре фарбує більшість бактерій, що дозволяє чіткіше розглянути їх морфологію і полегшує процес їх виявлення в порівнянні з методом забарвлення за Грамом. Для проведення фарбування по ГИМС сухі препарати сечового осаду після фарбування промиваються. При цьому білки плазми «приклеюють» кров'яні клітини до скла. Однак, концентрація білків в сечі часто недостатня для збереження осаду. Для підвищення вмісту білків в осаді сечі в відфільтрований осад можна додати невелику краплю бесклеточной плазми крові. Потім сечовий осад піддається ресуспендування приблизно в 0,5 мл сечі, і крапля отриманої суспензії поміщається на предметне скло, як описано для процедури приготування мазка периферичної крові. Потім препарату перед фарбуванням дають остаточно підсохнути.

Результати дослідження сечового осаду слід інтерпретувати з урахуванням методу збору, значень питомої ваги і свіжості зразка сечі. Зразок, отриманий методом природного виділення сечі з організму, може містити клітини, які потрапляють в сечу з сечостатевих шляхів. Затримка з проведенням аналізу сечі може привести до розростання в пробі бактерій або грибів [8].

Висновок

Лабораторні методи дослідження в діагностичному відношенні не належать до числа специфічних, тобто строго патогномонічних для різних захворювань. Їх використання диктується необхідністю отримання більш точних даних про вираженість та динаміку патологічних змін в організмі хворих тварин, стані функціональних резервних можливостей дихання, кровообігу, водно-електролітного балансу, харчування і білкового обміну, системи гемостазу та ендокринного фону, ендогенної інтоксикації, загальної опірності.

До використання загальноклінічних методів лабораторного дослідження приступають відразу після завершення фізикального обстеження, а в невідкладних ситуаціях в ході його проведення. Найбільш поширеними, виконуваними в першочерговому порядку є: вивчення показників крові, аналізи сечі та інші.

Дані методи широко застосовуються для діагностики різних захворювань і, грунтуючись на показаннях цих перших, загальнодоступних прийомів, вже з перших годин лікування хворих тварин з урахуванням клінічних показників їх стану, можна оцінити ефективність, зміст та інтенсивність заходів з надання їм допомоги.

Список літератури

1. Березів, Т.Т., Коровкін, Б.Ф. Біологічна хімія // Т.Т. Березів, Б.Ф. Коровкін. - М .: Медицина, 1990

2. Долгов, В.В., Морозова, В.А. Клініко-діагностичне значення лабораторних показників // В.В. Боргів, В.А. Морозова. - М .: Медицина, 1997

3. Козлов, А.А., Берковський, А.Л., Простакова, Т.М. Клінічна лабораторна діагностика // А.А. Козлов, А.Л. Берковський, Т.М. Простакова. - М .: Світ бібліографії. - 1997, №9., - С. 19-20

4. Мейер Д., Харві Д. Ветеринарна лабораторна медицина. Інтерпретація і діагностика // Д. Мейер, Д. Харві. - М .: Сфоіон, 2007

5. Клінічний діагноз - лабораторні основи / Под ред. В.В. Меньшикова, І.І. Дєдова. - М .: Медицина, 1987

6. Довідник з клінічним методам дослідження / Под ред. Е.А. Кост. - М .: 2е вид., 1975

7. Медичні лабораторні технології і діагностика / Под ред. А.М. Карпіценко. - С - Петербург .: Довідник, Т.1, 1998

8. Енциклопедія клінічних лабораторних тестів / Под ред. М. Тіца. - М .: Династія, 2007

Авіація і космонавтика
Автоматизація та управління
Архітектура
Астрологія
Астрономія
Банківська справа
Безпека життєдіяльності
Біографії
Біологія
Біологія і хімія
Біржова справа
Ботаніка та сільське господарство
Валютні відносини
Ветеринарія
Військова кафедра
Географія
Геодезія
Геологія
Діловодство
Гроші та кредит
Природознавство
Журналістика
Зарубіжна література
Зоологія
Видавнича справа та поліграфія
Інвестиції
Інформатика
Історія
Історія техніки
Комунікації і зв'язок
Косметологія
Короткий зміст творів
Криміналістика
Кримінологія
Криптологія
Кулінарія
Культура і мистецтво
Культурологія
Логіка
Логістика
Маркетинг
Математика
Медицина, здоров'я
Медичні науки
Менеджмент
Металургія
Музика
Наука і техніка
Нарисна геометрія
Фільми онлайн
Педагогіка
Підприємництво
Промисловість, виробництво
Психологія
Психологія, педагогіка
Радіоелектроніка
Реклама
Релігія і міфологія
Риторика
Різне
Сексологія
Соціологія
Статистика
Страхування
Будівельні науки
Будівництво
Схемотехніка
Теорія організації
Теплотехніка
Технологія
Товарознавство
Транспорт
Туризм
Управління
Керуючі науки
Фізика
Фізкультура і спорт
Філософія
Фінансові науки
Фінанси
Фотографія
Хімія
Цифрові пристрої
Екологія
Економіка
Економіко-математичне моделювання
Економічна географія
Економічна теорія
Етика

8ref.com

© 8ref.com - українські реферати


енциклопедія  бефстроганов  рагу  оселедець  солянка