трусики женские украина

На головну

 Способи рекультивації нафтозабруднених грунтів і грунтів з упором на підходи биоремедиации - Екологія

Реферат

Дипломна робота 47 сторінок, 2 малюнка, 3 таблиці, 50 джерел.

Нафти, нафтопродуктів, ПОЧВА, нафтове забруднення, РЕКУЛЬТИВАЦІЯ, біоремедіації, МІКРООРГАНІЗМИ, дощові черв'яки

Дипломна робота присвячена розгляду способів рекультивації нафтозабруднених грунтів і грунтів з упором на підходи биоремедиации.

Мета роботи - розгляд методів і способів знешкодження нафтозабруднених субстратів.

Перша глава роботи присвячена проблемі нафтового забруднення, де особливу увагу приділено грунтам, забрудненим нафтою і нафтопродуктами. У другому розділі розглянуто методи оцінки нафтового забруднення ґрунтів. Методи відновлення нафтозабруднених грунтових екосистем розглянуті в третьому розділі. У ній показані основні методи рекультивації нафтозабруднених грунтів, особлива увага приділяється биоремедиации і дослідженню з трансформації нафти в грунті мікробіологічними препаратом і дощовими хробаками.

Зміст

Введення

1. Вплив нафти і нафтопродуктів на навколишнє природне середовище

1.1 Компоненти нафти і їх дія

1.2 Нафтове забруднення грунтів

1.2.1 Механічні порушення ґрунтового покриву

1.2.2 Хімічне забруднення грунтів

1.2.3 Вплив нафтового забруднення на мікробіологічні процеси в грунті

2. Методи оцінки нафтового забруднення грунтів

2.1 Нормування забруднення ґрунтів нафтою і нафтопродуктами

2.2 Методи контролю

2.3 Методи біоіндикації та біотестування грунтів

3. Методи відновлення нафтозабруднених грунтових екосистем

3.1 Класифікація методів рекультивації грунтів, забруднених нафтою і нафтопродуктами

3.2 Основні підходи і роль биоремедиации у відновленні нафтозабруднених грунтів

3.3 Мікроорганізми-деструктори нафти і нафтопродуктів

3.4 Трансформація нафти в грунті мікробіологічними препаратом і дощовими хробаками

3.5 Методи рекультивації засновані на інтенсифікації процесів самоочищення

Висновок

Список використаних джерел

Введення

Нафта є одним з основних факторів світового економічного розвитку в 20 столітті і залишається найважливішим енергоресурсом на найближче майбутнє. Відносно невисокі ціни на нафту і нафтопродукти при великих обсягах їх споживання, відсутність адекватної створюваної загрозі політики з охорони навколишнього середовища приводили до вельми значних втрат, наслідками яких з'явилися забруднення грунтів і грунтів.

Нафтове забруднення - як за масштабами, так і за токсичністю являє собою загальнопланетарну небезпеку. Нафта і нафтопродукти викликають отруєння, загибель організмів і деградацію ґрунтів. Природне самоочищення природних об'єктів від нафтового забруднення - тривалий процес, особливо в умовах Сибіру, ??де тривалий час зберігається знижений температурний режим. Тому виняткову актуальність набуває проблема рекультивації нафтозабруднених грунтів.

В даний час однією з найбільш перспективної технології очищення нафтозабруднених грунтів вважається інтродуційованих в грунт різних комплексів мікроорганізмів, що відрізняються підвищеною здатністю до біодеструкції тих чи інших вуглеводневих компонентів нафти і нафтопродуктів.

У природних умовах биотрансформация нафти і нафтопродуктів здійснюється під впливом комплексу самих різних груп організмів. Особлива увага приділяється дослідженням щодо спільного впливу представників двох суміжних трофічних рівнів: мікроорганізмів і дощових черв'яків на Елімінування нафти в грунті.

Метою дипломної роботи є розгляд методів і способів знешкодження нафтозабруднених субстратів.

1. Вплив нафти і нафтопродуктів на навколишнє природне середовище

Нафта, продукти її переробки та газоконденсату мають негативний вплив на повітря, воду і грунт. Підприємства паливно-енергетичного комплексу Росії, в тому числі - з видобутку та переробки нафти, не дивлячись на зниження обсягів виробництва, залишаються найбільшим у промисловості джерелом забруднювачів навколишнього середовища. На їх частку припадає близько 48% викидів шкідливих речовин в атмосферу, 27% скидання забруднених стічних вод, понад 30% твердих відходів і до 70% загального обсягу парникових газів (Абросимов, 2002).

За величиною прогнозних ресурсів нафти і газу Східний Сибір відноситься до числа потенційно найбільш сприятливих геологічних об'єктів в материковій частині Росії. Основні розвідані запаси нафти - 83% - зосереджені в Верхнечонское, газу - 79% - в Ковиктінському родовищах. Розвідані запаси вуглеводнів в Іркутській області, від їх прогнозної оцінки, складають всього: по нафті - 10,7%, по газу - 18,6% (Державний доповідь ..., 2004). В останні роки для забезпечення північних селищ нафтою в якості котельного палива, проводиться дослідно-промислова експлуатація ряду цих родовищ: Атовского газоконденсатного, Марківського, Ярактінское, Даниловського, Дулісмінского нафтогазоконденсатних родовищ. Таким чином, для Іркутської області проблема нафтового забруднення навколишнього середовища є досить актуальною.

Одна з серйозних глобальних проблем - забруднення ґрунтового покриву нафтою і нафтопродуктами. Вирішення проблеми очищення грунтового покриву від забруднень нафтою, розробка нових і вдосконалення існуючих технологій відновлення нафтозабруднених земель, відноситься до числа пріоритетних. Ця проблема торкнулася і Іркутської області. Станом на 01.01.2004 року в Іркутській області налічувалося 27883 га порушених земель. Найбільша частка порушених земель припадає на райони та міста з інтенсивним видобутком корисних копалин. У 2003 році рекультивовано 1850 гектарів порушених земель, що майже в 3 рази більше, ніж у попередньому (Державний доповідь ..., 2004).

Екологічні проблеми починаються вже на стадії видобутку нафтової сировини і його постачання на підприємства. Найбільш характерними забруднювачами довкілля є вуглеводні (44,9% від сумарного викиду), оксид вуглецю (47,4%) і різні тверді речовини (4,3%). Не менш гострі проблеми виникають при транспортуванні нафти на нафтопереробні підприємства. Нафта транспортується по трубопроводах, схильним корозії, відкладенням смол і парафінів всередині труб. Щорічно відбувається понад 60 великих аварій і близько 20 тис. Випадків, що супроводжуються значними розливами нафти, попаданням її у водойми, загибеллю людей, великими матеріальними втратами (Абросимов, 2002).

1.1 Компоненти нафти і їх дія

Нафта (тур. Neft, від перс. Нафт), горюча масляниста рідина, поширена в осадової оболонці Землі; найважливіша корисна копалина. Складна суміш алканів, деяких циклоалканов і аренов, а також кисневих, сірчистих і азотистих сполук (Радянський ..., 1981).

Хімічний склад нафти залежить від району видобутку і в середньому визначається такими даними: вуглець (83-87%), водень (12-14%), азот, сірка, кисень (1-2%, рідше 3-6% за рахунок сірки) . Десяті й соті частки відсотка складають численні мікроелементи, набір яких у будь нафти приблизно однаковий.

До нафтопродуктів зазвичай відносять різні вуглеводневі фракції, одержувані з нафт. Основні компоненти нафтопродуктів - вуглеводні. Поряд з вуглеводнями в нафтопродуктах, як і в нафтах, також містяться сполуки сірки, азоту і кисню.

При нафтовому забрудненні тісно взаємодіють три групи екологічних факторів: 1) унікальна многокомпонентность складу нафти, що знаходиться в процесі постійної зміни; 2) гетерогенність складу і структури будь-якої екосистеми, що знаходиться в процесі постійного розвитку; 3) різноманіття і мінливість зовнішніх факторів, під впливом яких знаходиться екосистема: температура, тиск, вологість, стан атмосфери, гідросфери і т. Д. (Відновлення ..., 1988).

Цілком очевидно, що оцінювати наслідки забруднення екосистеми нафтою і намічати шляхи ліквідації цих наслідків необхідно з урахуванням конкретного поєднання цих трьох груп факторів.

В якості еколого-геохімічних характеристик основного складу нафти прийняті зміст легкої фракції (початок кипіння 200 ° С), метанових вуглеводнів (включаючи тверді парафіни), циклічних вуглеводнів, смол і асфальтенів, сірчистих сполук (Відновлення ..., 1988).

Легка фракція нафти, куди входять найбільш прості за будовою низькомолекулярні метанові (алкани), нафтенові (циклопарафіни) і ароматичні вуглеводні - найбільш рухома частина нафти.

Більшу частину легкої фракції складають метанові вуглеводні з числом вуглеводневих атомів від 5 до 11 (пектан, гексан, гептан, октан, нонан, декан, Ундекан). Нормальні (нерозгалужені) алкани складають у цій фракції 50-70%.

Метанові вуглеводні легкої фракції, перебуваючи в грунтах, надають наркотичне і токсичну дію на живі організми. Особливо швидко діють нормальні алкани з короткою вуглеводневої ланцюгом, що містяться в основному в легенях фракціях нафти. Ці вуглеводні краще розчинні у воді, легко проникають у клітини організмів через мембрани, дезорганізують цитоплазмових мембрани організму. Нормальні алкани, що містять у ланцюжку менш 9 атомів вуглецю, більшістю мікроорганізмів не асимілюються, хоча можуть бути окислені. Їх токсичність послаблюється в присутності нетоксичного вуглеводню, який зменшує загальну розчинність алканів (Гриценко та ін., 1997).

Багато дослідників відзначають сильне токсичну дію легкої фракції на мікробні спільноти і грунтових тварин. Легка фракція, мігруючи по грунтовому профілю і водоносних горизонтів, розширює, іноді значно, ореол первісного забруднення. На поверхні ця фракція в першу чергу піддається фізико-хімічних процесів розкладання, що входять до її складу вуглеводні найбільш швидко переробляються мікроорганізмами (Відновлення ..., 1988).

Зі змістом легкої фракції корелюють інші характеристики нафти: вуглеводневий склад, кількість смол і асфальтенів. Зі зменшенням вмісту легкої фракції її токсичність знижується, але зростає токсичність ароматичних сполук, відносний вміст яких зростає.

Значна частина легкої фракції нафти розкладається і випаровується ще на поверхні грунту або змивається водними потоками. Шляхом випаровування з ґрунту віддаляється від 20 до 40% легкої фракції (Відновлення ..., 1988).

У нафтах, багатих легкої фракцією, суттєву роль відіграють більш високомолекулярні метанові вуглеводні (С12 - С27), що складаються з нормальних алканів і ізоалканов. Метанові вуглеводні у фракції, киплячій вище 200 ?С, практично нерозчинні у воді. Їх токсичність виражена значно слабкіше, ніж у більш низькомолекулярних структур.

Зміст твердих метанових вуглеводнів (парафіну) у нафти (від дуже малих кількостей до 15-20%) - важлива характеристика при вивченні нафтових розливів на грунтах. Твердий парафін не токсичний для живих організмів, але внаслідок високих температур застигання (+18 ?С і вище) і розчинності нафти (+40 ?С) в умовах земної поверхні він переходить в твердий стан, позбавляючи нафту рухливості. Тверді парафіни, виділені з нафти і очищені, з успіхом застосовуються в медицині (Відновлення ..., 1988).

Твердий парафін дуже важко руйнується, насилу окислюється на повітрі. Він надовго може «запечатати» усі пори грунтового покриву, позбавивши грунт вільного влагообмена і «дихання». Це, в свою чергу, призводить до повної деградації біоценозу.

До циклічним вуглеводням у складі нафти відносяться нафтенові (Циклоалкани) і ароматичні (арени).

Циклоалкани - це кільця з радикалів СН2, з насиченими зв'язками. Часто в одному або декількох радикалах замість одного атома водню приєднана ланцюжок алкана різної довжини. Загальний вміст нафтенових вуглеводнів в нафті змінюється від 35 до 60%, в деяких випадках складаючи менше або більше наведених крайніх значень (Петров, 1984).

Про токсичності нафтенових вуглеводнів відомостей майже немає. Циклічні вуглеводні з насиченими зв'язками окислюються дуже важко. Біодеградацію циклоалканов ускладнює їх мала розчинність і відсутність функціональних груп (Відновлення ..., 1988).

Ароматичні вуглеводні - найбільш токсичні компоненти нафти. У концентрації всього 1% у воді вони вбивають всі водні рослини; нафту, що містить 38% ароматичних вуглеводнів, значно пригнічує ріст вищих рослин. Зі збільшенням ароматичности нафти збільшується її гербіцидна активність. Вміст ароматичних вуглеводнів у нафті змінюється від 5 до 55%, найчастіше від 20 до 40%. Основну масу ароматичних структур складають моноядерних вуглеводні - гомологи бензолу. Поліциклічні ароматичні вуглеводні, т. Е. Вуглеводні, що складаються з двох і більше ароматичних кілець, містяться в нафті в кількості від 1 до 4% (Відновлення ..., 1988).

Бензол і його гомологи роблять більш швидке токсичну дію на організм, ніж поліциклічні ароматичні вуглеводні (ПАВ). Останні діють повільніше, але більш тривалий час, будучи хронічними токсикантами. Ароматичні вуглеводні важко піддаються руйнуванню. Зазвичай вони окислюються мікроорганізмами (Шиліна, 1985).

Смоли і асфальтени відносяться до високомолекулярних невуглеводневі компонентам нафти. У складі нафти вони грають виключно важливу роль, визначаючи багато в чому її фізичні властивості і хімічну активність. Структурний каркас смол і асфальтенів складають висококонденсований поліциклічні ароматичні структури, що складаються з десятків кілець, з'єднаних між собою гетероатомних структурами, що містять сірку, кисень, азот. Смоли - в'язкі мазеподібними речовини, асфальтени - тверді речовини, нерозчинні в низькомолекулярних вуглеводнях. Відносна молекулярна маса смол - 500-1200, асфальтенов - 1200-3000 (Панов та ін., 1986).

За змістом смол і асфальтенів нафти поділяються на малосмолисті (від 1-2 до 10% смол і асфальтенів), смолисті (10-20%), високосмолістие (23-40%). Частка асфальтенов в смолисто-асфальтенових речовинах становить: у малосмоліс-тій нафти -7-10, у смолистої - 15-26, високосмолістой - 17-40% (Гриценко та ін., 1997).

Смоли і асфальтени містять основну частину мікроелементів нафти, у тому числі майже всі метали. Загальний вміст мікроелементів в нафти - соті, десяті частки відсотка.

Смолисті речовини дуже чутливі до елементарного кисню і активно приєднують його. На повітрі смолистая нафту швидко гусне, втрачає рухливість. Якщо нафта просочується зверху, її смолисто-асфальтеновие компоненти сорбуються в основному у верхньому, гумусового горизонту, іноді міцно цементуючи його. При цьому зменшується поровий простір грунту. Смолисто-асфальтеновие компоненти гідрофобні. Обволікаючи коріння рослин, вони різко погіршують надходження до них вологи, в результаті чого рослини засихають. Ці речовини малодоступні мікроорганізмів, процес їх метаболізму йде повільно, іноді десятки років. Токсична ж вплив роблять деякі важкі метали у складі смол і асфальтенів. Останні малодоступні мікроорганізмів і зазвичай залишаються в грунтах у вигляді міцного органо-мінерального комплексу (Відновлення ..., 1988).

З різних сполук сірки в нафті найбільш часто виявляються сірководень, меркаптани, сульфіди, дисульфіди, вільна сірка. Сірчисті з'єднання мають шкідливий вплив на живі організми. Особливо сильним токсичною дією володіють сірководень і меркаптани.

1.2 Нафтове забруднення грунтів

При освоєнні, облаштуванні та експлуатації родовищ нафти і газу значною мірою змінюється природний ландшафт і йде інтенсивне забруднення земель.

Ґрунтовий покрив - основний елемент ландшафту - першим приймає на себе «екологічний удар». У зв'язку з механічним порушенням і нерідко хімічним забрудненням відбувається поступова деградація ґрунтів, яка стала однією з основних екологічних проблем нафтогазового комплексу.

Найбільший збиток природі завдають аварії на магістральних нафто- і газопроводах. Так, при одному пориві нафтопроводу викидається в середньому 2 т нафти, що виводить з ладу 1000 м? землі, а в результаті аварії на газоконденсатопроводів на землю в середньому потрапляє не менше 2 млн. Т / рік нафтопродуктів (Гриценко та ін., 1997).

Нафта, потрапляючи в грунт, викликає значні, часом незворотні зміни її властивостей - утворення бітумінозних солончаків, гудронізацію, цементацію і т. Д. Ці зміни тягнуть за собою погіршення стану рослинності та біопродуктивності земель. В результаті порушення ґрунтового покриву і рослинності посилюються небажані природні процеси - ерозія грунтів, деградація, кріогенез.

Проблема деградації грунтів вимагає від компетентних галузевих служб прийняття негайних заходів, оскільки з грунтами пов'язана біологічна продуктивність всього ландшафту.

Деградація ґрунтів виникає в результаті різних природних і антропогенних причин, приймаючи форми хімічного забруднення, опустелювання, заболочення і т.д. Антропогенна деградація є або безпосереднім результатом залпової техногенного навантаження (механічна, хімічна), або пов'язана з природними гіпергенними або грунтоутворювального процесу.

У результаті формуються окремі поєднання несприятливих ґрунтових властивостей, і відбувається зниження біологічної продуктивності ландшафтів.

1.2.1 Механічні порушення ґрунтового покриву

Механічне порушення грунтів спостерігається на всіх об'єктах нафтової та газової галузі і пов'язане з будівельними (зведення бурових установок, гирлового обладнання, прокладка трубопроводів, будівництво промислових корпусів, житлових селищ і комунікацій) і рекультиваційних (зняття родючого шару, засипка траншей, планування комор та ін. ) роботами. Цей різновид техногенного впливу на грунти властива промислового освоєння природного середовища взагалі і не є специфічною для нафтогазового комплексу. Масштаби порушень грунтового покриву, викликаних механічним впливом, залежать, з одного боку, від розміру та призначення зводяться споруд, а з іншого - від вразливості природного середовища в різних біогеоценозах.

Зняття родючих горизонтів грунту має два основних слідства. По-перше, кардинально змінюються грунтові властивості (фізичні, хімічні, біологічна активність). По-друге, розвиваються невластиві непорушеному грунтовому покриву гіпергенні процеси (водна та вітрова ерозія, заболочування, деградація боліт та ін.) Або інтенсивність цих процесів зростає (Трофимов та ін., 1979).

При механічному руйнуванні ґрунтового профілю, як правило, відбувається часткове або повне знищення гумусоаккумулятівних горизонтів, що визначають актуальне родючість, перемішування матеріалу різних горизонтів, що виконують в непорушеному ландшафті самостійну екологічну функцію, впровадження підстилаючих порід з несприятливими фізичними властивостями і низьким потенційним родючістю.

Так, в результаті досліджень в районі підземного сховища газу встановлено, що на його території ґрунтовий шар характеризується зниженим вмістом гумусу, азоту, низькою сумою обмінних основ у порівнянні з аналогічними показниками фонових грунтів (Сидорова та ін., 1994).

1.2.2 Хімічне забруднення грунтів

Основні причини хімічного забруднення грунтів на об'єктах нафтогазової галузі наступні (Панов та ін., 1986):

- На нафтогазовидобувних підприємствах: виникнення газових і нафтових фонтанів, самозаймання газу, викиди підземних високомінералізованих вод, скидання забруднених стічних вод на рельєф, розлив бурової рідини, ліквідація комор, розлив метанолу, що надходить від установки регенерації, складування шламообразних відходів, дифузна міграція газу, виливши пластової суміші, викид продуктів згорання палива і т. д;

- На нафто- та газотранспортних підприємствах: розлив вуглеводневого конденсату, інгібіторів корозії, газопроводів, розлив турбінного палива, метанолу, органічних кислот, поверхнево-активних речовин (ПАР), мастильних компресорних масел;

- На нефтегазоперерабативающих підприємствах: розлив і витоку конденсату і мастильних масел, а також хімреагентів (метанолу, діетиленгліколю, діетаноламіну та ін.).

Таким чином, основними забруднювачами грунтів в нафтовій і газовій галузях є: рідини (нафтові вуглеводні, мінералізовані пластові води, хімреагент, бурові розчини); гази (попутний і природний газ і продукти його згоряння); тверді речовини (шлами, сірчана пил в районах підприємства переробки сірчистого вуглеводневої сировини).

Хімічне забруднення грунту негативно впливає на її фізичні, хімічні, іонообмінні властивості і біологічну активність (Панов та ін., 1986).

Показники зміни цих властивостей грунту доцільно використовувати в якості ознак її деградації. Це особливо актуально для об'єктів нафтогазового комплексу, так як в даному випадку завдання визначення ГДК ускладнюється многокомпонентностью більшості забруднювачів грунту (Панов та ін., 1986).

1.3 Вплив нафтового забруднення на мікробіологічні процеси в грунті

Процес природного фракціонування і розкладання нафти починається з моменту її надходження на поверхню грунту. Виділяють три найбільш загальних етапу трансформації нафти в грунтах (Ісмаїлов та ін., 1988):

1) фізико-хімічне і частково мікробіологічне розкладання аліфатичних вуглеводнів;

2) мікробіологічне руйнування головним чином низькомолекулярних структур різних класів, новоутворення смолистих речовин;

3) трансформація високомолекулярних сполук; смол, асфальтенів, поліциклічних вуглеводнів.

Тривалість всього процесу трансформації нафти в різних грунтово-кліматичних зонах різна: від декількох місяців до декількох десятків років (Бочарнікова, 1990).

Забруднення нафтою чинить негативний вплив на хімічні, фізичні та біологічні властивості ґрунтів. Під впливом нафти та її компонентів змінюється чисельність мікроорганізмів основних фізіологічних груп, погіршуються агрофізичні, агрохімічні властивості грунту, знижуються активність окисно-відновних і гідролітичних ферментів, забезпеченість грунту рухомими формами азоту і фосфору.

На розкладання нафти в грунті вирішальним чином впливає функціональна активність комплексу ґрунтових мікроорганізмів, які забезпечують повну мінералізацію нафти і нафтопродуктів до вуглекислого газу і води. На першій стадії зміна грунтової біоти характеризується масовою загибеллю мезо- і мікрофауни; на другій стадії - «бумом» мікробіологічної активності спеціалізованих мікроорганізмів і подальшої поступової еволюцією біоценозу, що корелює з постійно мінливих геохимической ситуацією в грунті (Логінов та ін., 2000).

У роботі Н. А. Киреєвої показана токсичність ароматичних вуглеводнів для мікроорганізмів грунту і їх негативний вплив на ферментативну активність. Найбільш чутливими до забруднення ароматичними вуглеводнями є нитрифицирующие і целлюлозоразрушающіх мікроорганізми, які можуть служити індикаторами забруднення ґрунтів (Киреева, 1995).

Забруднення нафтою істотно змінює комплекс грунтових актиноміцетів, знижуючи їх чисельність і збіднюючи видовий склад. Крім того, в забрудненій нафтою ґрунті зростає число фітопатогенних і фітотоксичних видів мікроскопічних грибів. Розвиток фітотоксичних форм грибів може посилити негативний вплив на ґрунт нафтового забруднення (Кірєєва, 1996).

Показано, що забруднення нафтою призводить до суттєвого (на два порядки) зниження чисельності гетеротрофною частини мікробного комплексу, зазначеного на початкових етапах впливу нафти. Через три місяці відбувається відновлення чисельності гетеротрофів (Сидоров та ін., 1997).

Спочатку, в інтервалі концентрацій нафти відповідних зоні гомеостазу (до 1 мл / кг), вона не робить істотного впливу на ґрунтову мікробіоту, виступає як біологічний стимулятор. Більш високі дози (зона стресу 1-30 мл / кг) призводять до незворотних змін мікробіологічних властивостей ґрунту, а в подальшому, - до порушення її водно-повітряного режиму. Потім, в зоні резистентності, вона стає основним трофическим субстратом для углеводородокисляющих мікроорганізмів, одночасно пригнічуючи жізнедеятель-ність інших гетеротрофних мікроорганізмів, рослин і тварин. Нарешті, при ще більших дозах, в зоні репресії, нафта виступає як інгібітор біологічної активності грунту (Левін та ін., 1995).

Зміни мікробіологічних параметрів грунту першими розглядаються як значущі екологічні порушення. Вони зафіксовані при концентраціях нафти більше 1-5 мл / кг залежно від типу грунту.

2. Методи оцінки нафтового забруднення грунтів

2.1 Нормування забруднення ґрунтів нафтою і нафтопродуктами

Вироблення методології боротьби із забрудненням навколишнього середовища нафтою і нафтопродуктами вкрай складна справа. Реакція грунтів на забруднення нафтою, їх чутливість до цих забруднювачів відрізняються в різних ґрунтових зонах, також у межах сполучених ландшафтів.

Гранично допустимі концентрації нафтових забруднень у грунтах залежать від виду нафтопродуктів (НП) і становить для грунту 0,1 мг / кг. Однак ГДК сумарного вмісту нафтопродуктів у ґрунті не стандартизовано; встановлено ГДК для деяких видів нафтопродуктів: бензол - 0,3 мг / кг, толуол - 0,3 мг / кг, ксилол - 0,3 мг / кг (Саксонов та ін., 2005).

Мінімальний рівень вмісту нафтопродуктів у ґрунтах і ґрунтах, вище якого настає погіршення якості природного середовища, розглядається як верхній безпечний рівень концентрації (ВБУК) (Піковський, 1993). ВБУК нафтопродуктів у грунтах залежить від поєднання багатьох чинників, таких як тип, склад і властивості ґрунтів і ґрунтів, кліматичні умови, склад нафтопродуктів, тип рослинності, тип землекористування та ін. Ці норми повинні відрізнятися в залежності від кліматичних умов і типів грунтоутворення.

Верхній безпечний рівень концентрації НП в грунтах можна прийняти за орієнтовний рівень допустимої концентрації (ОДК) в грунтах. Орієнтовним допустимим рівнем забруднення грунту НП пропонується вважати нижній допустимий рівень забруднення, при якому в даних природних умовах грунт протягом одного року відновить свою продуктивність, а негативні наслідки для грунтового біоценозу можуть бути мимовільно ліквідовані. Така оцінка ОДК як загальносанітарного показника може бути дана для верхнього гумусо-акумулятивного горизонту грунтів (приблизно до глибини 20-30 см) (Саксонов та ін., 2005).

Цілком очевидно, що ОДК нафти і НП в грунті не може бути єдиним для всіх типів грунтів і природних зон. Він залежить від факторів, що визначають вплив речовини на властивості ґрунтів і рослин, від потенціалу самоочищення ґрунтів, від даного виду забруднення. Головні з таких факторів - хімічний склад забруднюючої речовини, властивості і склад грунтів, фізико-географічні (головним чином, кліматичні) умови даної території (Піковський, 2003).

В огляді МакДжі (McGill, 1977) наводяться дані дослідників з різних країн по встановленню безпечних меж вмісту нафти і НП в грунтах. Ці оцінки істотно розходяться з причини різко різних кліматичних і грунтових умов тих районів, де проводилися експерименти.

На основі повідомлення світового досвіду та даних експериментів МакДжілом складена таблиця орієнтовних нормативів вмісту НП в грунтах, що підлягають рекультивації (таблиця 2.1).

Таблиця 2.1 - Відносна ступінь порушеності грунтів, що містять різні кількості нафти

 Ступінь порушеності

 Зміст нафти в грунті,

 мг / кг сухого ґрунту

 Від легкої до помірної: за відсутності будь-яких спеціальних заходів відзначається деяке тимчасове ослаблення зростання рослинності 5000-20000

 Від помірної до високої: нормально розвиватися здатні лише деякі види рослин; відновлення ґрунтів можливо протягом трьох років; без рекультивації відновлення потре-бует в 2-3 рази більше часу 20000-50000

 Від високої до дуже високої: нафта фронтально просочує грунт на гли-бину 10 см; лише деякі рослини виживають; при раціональній рекульті-ваціі відновлення грунту займають 20 і більше років Понад 50000

2.2 Методи контролю

При кількісних оцінках рівня нафтових забруднень найбільшого поширення набули методи інфрачервоної спектрофотометрії, ультрафіолетової люмінесценції, газової та газорідинної хроматографії.

ІЧ-спектроскопія. Всі органічні речовини мають в інфрачервоному діапазоні свої індивідуальні спектри поглинання. Положення смуг поглинання в ІЧ-спектрах речовин характеризується довжиною хвилі l, нм (мкм) (Мітчелл та ін., 1980). Для ІЧ-аналізу вуглеводнів використовують діапазон від 0,7 до 25 мкм, який зазвичай поділяють на три області: ближню - 0,7-2,5 мкм, область основних частот - 2,6-6 мкм, далеку - 6-25 мкм .

Ближня ІЧ-область для аналітичних визначень в технологічних і екологічних цілях в нашій країні на відміну від багатьох розвинених країн практично не освоюється.

Найбільш широко використовується область основних частот. Нормативні документи з аналізу сумарного забруднення навколишнього середовища нафтопродуктами з ІЧ-спектроскопическим закінченням регламентують проведення вимірювань в інтервалі довжин хвиль 3,3-3,5 мкм. Стандартна суміш, що містить 37,5% изооктана, 37,5% цетана, 25% бензолу, призначена для калібрування приладів в цій області (Проскуряков, 1995).

Дальня ІЧ-область використовується в основному для ідентифікації джерела забруднення, а також для визначення типів нафт за показником ароматизований і для структурно-групового аналізу (Проскуряков, 1995).

Пробопідготовка для ІЧ-детектування не викликає складнощів. Аналіз вимагає малої кількості речовини будь молекулярної маси в будь-якому агрегатному стані. Після аналізу речовина залишається незмінним (Саксонов та ін., 2005). Принципово новим кроком стало створення лабораторних Ік-спектрометрів на основі Фур'є-перетворення. Більшість вітчизняних нафтопродуктів проводять вимірювання концентрацій нафтових забруднень на одній довжині хвилі. Слід виділити прилад Ікан-1, в якому передбачена можливість установки будь-якої довжини хвилі в діапазоні від 1,85 до 3,5 мкм з індикацією її значення на цифровому табло. Це дає принципово нову можливість проводити аналіз багатокомпонентних сумішей на декількох довжинах хвиль.

Існуючі люмінесцентні методи оцінки нафтового забруднення характеризуються високою експресному та чутливістю. Вони дозволяють визначати мікроелементи, а також сумарний вміст забруднюючих органічних речовин та індивідуальних органічних сполук.

Прилади для люмінесцентного аналізу можуть бути розділені на дві групи: Флуоріметри і спектрофлуоріметри. У флуориметр використовують світлофільтри, а в спетрофлуоріметрах - дифракційні грати.

У нашій країні найбільшого поширення набув люмінесцентно-фотометричний аналізатор «Флюорат-0,2». У цьому приладі джерелом збудження люмінесценції служить газорозрядна лампа (для вимірювання нафтопродуктів - ксеноновая). Незважаючи на високу чутливість люмінесцентного методу, при використанні приладів типу «Флюорат-0,2» для вимірювання сумарного вмісту НП виникає проблема калібрування приладу по стандартному розчину, що необхідно для отримання достовірних даних. Однак, до теперішнього часу такий стандартний розчин для люмінесцентних методів відсутня. Стандартний розчин ізооктан - цетан - бензол, використовуваний для ІЧ-спектрометрії, виготовляється на чотирихлористому вуглеці, який поглинає в робочій області флуориметра, тому калібрування проводять по якомусь відомому НП, наприклад маслу Т-22 (Саксонов та ін., 2005). В результаті при вимірах «важких» НП (мазут та інші) прилад може дати похибку до 40-50%, а при визначенні «легких» НП (бензин та інше) результати вимірювань концентрації можуть бути занижені в декілька разів. Слід зазначити, що в європейських країнах ультрафіолетові методи аналізу застосовуються мало (Берні та ін., 1997).

Найбільш перспективними для моніторингу нафтопродуктів з одночасною ідентифікацією та розшифровкою хімічного складу є методи газової, газорідинної або високоефективної рідинної хроматографії. Найбільш поширений газохроматографічний метод, особливо в поєднанні з ІЧ-спектрометрією, що дозволяє визначати індивідуальні компоненти в суміші нафтопродуктів, що робить цей метод аналізу незамінним при встановленні джерела забруднення грунтів, ідентифікації речовин нафтового походження в процесі біодеградації, при дослідженні процесів руйнування нафтопродуктів.

Однак при виконанні масових аналізів його використання обмежене низькою продуктивністю і високою вартістю аналітичних робіт.

В основі всіх запропонованих методів лежить витяг нафти і нафтопродуктів з проб органічними розчинниками. Грунт є дуже важким об'єктом аналізу, оскільки її органічна частина досить складна і різноманітна за складом. У будь-якому грунті міститься від 1% до 15% органічних речовин залежно від типу грунту. Гумус становить 85-90% від загальної кількості органічної речовини грунту. Крім цього, в грунті містяться і неспецифічні речовини: жири, вуглеводи (целюлоза, пектини, пентозани, Манна і т.д.), протеїни, білки, амінокислоти, аміди, лігніни, дубильні речовини, терпени, смоли і т.п. Таким чином, при виборі розчинника необхідно враховувати складний хімічний склад, як визначається речовини - нафтопродукту, так і досліджуваного об'єкта - грунту (Почвенно-екологічний ..., 1994).

Багато авторів віддають перевагу гексані. Хімічні властивості гексана сприятливі для кількісного вилучення нафтопродуктів з грунту. Цей розчинник використовують для розробки прискорених варіантів методу оцінки ступеня забруднення ґрунтів нафтою. Дана методика визначення нафти і НП в грунті заснована на їх екстракції з грунту при конденсації киплячого гексану в апараті Сокстек.

Вміст нафтопродуктів в екстрактах визначають гравіметричним методом після відгону розчинника. У модельних дослідах була вивчена повнота екстракції нафти в залежності від часу взаємодії нафти і грунту. Встановлено, що навіть у перший день після додавання гексан витягує всього 60-75% внесеного кількості. З часом ступінь вилучення має тенденцію до зниження (Почвенно-екологічний ..., 1994).

За результатами хроматографічного дослідження аналізу гексановий екстракту було показано, що гексан не одержує гумінові кислоти та інші неспецифічні речовини грунтів. У теж час гексан розчиняє всі групи вуглеводнів, за винятком асфальтенов і високомолекулярних смол, вміст яких в нафтопродуктах зазвичай не перевищує 2% (Почвенно-екологічний ..., 1994).

До теперішнього часу створено безліч методик і приладів для екологічного моніторингу нафт і нафтопродуктів. Однак питання про розробку найбільш оптимальних методів їх визначення і ідентифікації не можна вважати закритим, оскільки у кожного методу є свої переваги і недоліки. До того ж, саме поняття «нафтопродукт» досить розпливчасто, особливо з урахуванням непостійності і різноманітності складу нафт і нафтопродуктів. Необхідний моніторинг нафтопродуктів з одночасною ідентифікацією та розшифровкою його хімічного складу.

нафтове забруднення грунт Біоремедіація

2.3 Методи біоіндикації та біотестування грунтів

Біодіагностика антропогенних змін відноситься до експресним методам аналізу і, крім того, дає комплексну оцінку екологічного стану грунту. Існує безліч біологічних показників, за допомогою яких оцінюється стан грунтів. Найбільш важливими є інтегральні показники біологічної активності: токсичність, «дихання», кількість вільних амінокислот і білків. Інтенсивність дихання грунту є виключно вариабельной величиною і залежить від великої кількості факторів (температурного режиму, вологості, стану фітоценозу та ін.). Для оцінки екологічного впливу забруднень необхідно проводити порівняння даних, отриманих на різних ділянках в максимально близьких умовах. Інформативними є й інші показники, наприклад, ферментативна активність.

Попадання нафти і нафтопродуктів у грунт призводить до зміни активності основних ґрунтових ферментів, що впливає на обмін азоту, фосфору, вуглецю і сірки (Кірєєва, Новосьолова та ін., 2001). Стійкі зміни в активності деяких грунтових ферментів можуть використовуватися в якості діагностичних показників забруднення грунтів нафтою. Зручна для цієї мети група ферментів, що об'єднуються під загальною назвою грунтові уреази. По-перше, вони менше схильні до дії інших екологічних факторів і, по-друге, простежується чітка залежність їх активності від ступеня забруднення ґрунтів (Киреева, Водоп'янов та ін., 2001).

Застосування мікроорганізмів для оцінки інтегральної токсичності грунту і створення на їх основі комплексної системи чутливих, достовірних і економічних біотестів є перспективною галуззю досліджень. Багато фізіологічні групи ґрунтових мікроорганізмів виявляють чутливість по відношенню до нафтових вуглеводнів.

Загальна чисельність мікроорганізмів, як правило, досить чітко відображає мікробіологічну активність ґрунту, швидкість розкладання органічних речовин і кругообігу мінеральних елементів. На підставі даного показника можна не тільки судити про ступінь забрудненості ґрунту нафтою, а й про її потенційної здатності до відновлення, а також про процеси розкладання нафти в природних природних умовах і при рекультивації забруднених ґрунтів (Киреева, 1995).

Нафтове забруднення може також сприяти накопиченню в грунті мікроскопічних грибів, що викликають захворювання рослин і фітотоксіни (Кірєєва, Кузяхметов та ін., 2003). Остання обставина грає важливу роль при розробці заходів щодо фитомелиорации нафтозабруднених земель.

Безпосередній вплив нафти на рослинний покрив в тому, що сповільнюється ріст рослин, порушуються функції фотосинтезу і дихання, відзначаються різні морфологічні порушення, сильно страждають коренева система, листя, стебла і репродуктивні органи. Оперативну інформацію про фітотоксичності забрудненого ґрунту можна отримати, використовуючи як тест-об'єктів насіння і проростки рослин. Для зручності постановки тестів на токсичність насіння підбирають за розмірами і швидкості їх проростання. Часто використовують насіння редиски, крес-салату, кукурудзи, зернових. В якості тест-функції виступають показники схожості насіння, дружності і часу появи сходів, швидкості подовження проростків, останній з яких вважається найбільш чутливим.

У природних екосистемах грунтові безхребетні широко використовуються для моніторингу на рівні комплексу видів (Трублаевіч, Семенова, 1997).

Набір тест-об'єктів з насіння рослин, мікроорганізмів, грунтових безхребетних і ферментів можна використовувати як у повному обсязі, так і частково, залежно від цільового призначення досліджень і ступеня нафтового забруднення грунту. Якщо проби з грунтовими ногохвостки і активність ферментів дають хорошу кількісну характеристику токсичності грунту при низької та середньої ступені її забруднення, то мікробіологічні тести зручні для опису стану сильнозагрязненних високотоксичних ґрунтів (Киреева, 1995).

3. Методи відновлення нафтозабруднених грунтових екосистем

Нафтове забруднення відрізняється від багатьох інших антропогенних впливів тим, що воно дає не поступову, а, як правило, «залпову» навантаження на середу, викликаючи швидку реакцію. При оцінці наслідків такого забруднення не завжди можна сказати, чи повернеться екосистема до стійкого стану або буде необоротно деградувати. У всіх заходах, пов'язаних з ліквідацією наслідків забруднення, з відновленням порушених земель, необхідно виходити з головного принципу: не завдати екосистемі більшої шкоди, ніж той, який вже завдано при забрудненні. Суть відновлення забруднених екосистем - максимальна мобілізація внутрішніх ресурсів екосистеми на відновлення своїх початкових функцій. Самовідновлення та рекультивація являють собою нерозривний біогеохімічний процес.

Природне самоочищення природних об'єктів від нафтового забруднення - тривалий процес, особливо в умовах Сибіру, ??де тривалий час зберігається знижений температурний режим. У зв'язку з цим, розробка способів очищення грунту від забруднення вуглеводнями нафти - одна з найважливіших завдань при вирішенні проблеми зниження антропогенного впливу на навколишнє середовище.

3.1 Класифікація методів рекультивації грунтів, забруднених нафтою і нафтопродуктами

Рекультивація земель - це комплекс заходів, спрямованих на відновлення продуктивності та господарської цінності порушених і забруднених земель. Завдання рекультивації - знизити вміст нафтопродуктів і перебувають з ними інших токсичних речовин до безпечного рівня, відновити продуктивність земель, загублену в результаті забруднення (Реймерс, 1990). В даний час розроблений ряд методів ліквідації нафтових забруднень ґрунту, що включають механічні, фізико-хімічні, біологічні методи (таблиця 3.1).

Таблиця 3.1 - Методи ліквідації нафтових забруднень ґрунту (Колесниченко, 2004).

 Методи Способи ліквідації Особливості застосування

 Механі-етичні Обвалка забруднення, відкачування нафти в ємності Первинні заходи при великих розливах при наявності відповідної техніки і резервуарів (проблема очищення грунту при просочуванні нафти в грунт не вирішується)

 Заміна грунту Вивіз грунту на звалище для природного розкладання

 Фізико-хімічні Спалювання Екстрена міра при загрозі прориву нафти у водні джерела. Залежно від типу нафти і нафтопродукту знищується від 50 до 70% розливу, інша частина просочується в грунт. Через недостатньо високої температури в атмосферу потрапляють продукти сублімації і неповного окислення нафти; землю після спалювання необхідно вивозити на звалище

 Запобігання загоряння При розливі легкозаймистих продуктів в цехах, житлових кварталах, на автомагістралях, де загоряння небезпечніше забруднення грунту; ізолюють розлив зверху протипожежними пенами або засипають сорбентами

 Промивання грунту Проводиться в промивних барабанах із застосуванням ПАР, промивні води відстоюються в гідроізольованих ставках або ємностях, де згодом проводяться їх поділ та очищення

 Дренування грунту Різновид промивки ґрунту на місці за допомогою дренажних систем; може поєднуватися з використанням нефтеразлагающіх бактерій

 Екстракція розчинниками Звичайно проводиться в промивних барабанах летючими розчинниками з подальшою відгонкою їх залишків паром

 Сорбція Розливи на порівняно твердої поверхні (асфальт, бетон, утрамбований грунт) засипають сорбентами для поглинання нафтопродукту і зниження пожежонебезпеки при розливі легкозаймистих продуктів

 Термічна десорбція Проводиться рідко при наявності відповідного обладнання, дозволяє отримувати корисні продукти аж до мазутних фракцій

 Біологічні Біоремедіація Застосовують нефтеразрушающіе мікроорганізми. Необхідна заорювання культури в грунт. Періодичні підгодівлі розчинами добрив, обмеження по глибині обробки, температурі грунту (вище 15?С), процес займає 2-3 сезони

 Фіторемедіація Усунення залишків нафти шляхом висіву нафтостойкий трав (конюшина повзуча, щавель, осока та ін.), Які активізують грунтову мікрофлору, є остаточною стадією рекультивації забруднених грунтів

До недавнього часу найбільш поширеним і дешевим методом ліквідації нафтового забруднення було просте спалювання. Цей спосіб неефективний і шкідливий з двох причин: 1) спалювання можливо, якщо нафта лежить на поверхні густим шаром або зібрана в накопичувачі, просочені нею грунт або грунт горіти не будуть; 2) на місці спалених нафтопродуктів продуктивність грунтів, як правило, не відновлюється, а серед продуктів згоряння, що залишаються на місці або розсіяних у навколишньому середовищі, з'являється багато токсичних, зокрема канцерогенних речовин (Гриценко, Акопова, 1997).

Очищення грунтів і грунтів в спеціальних установках шляхом піролізу або екстракції паром дорогостояща і малоефективна для великих обсягів ґрунту. Потрібні великі земляні роботи, в результаті чого порушується природний ландшафт, а після термічної обробки в очищеній грунті можуть залишитися новостворені поліциклічні ароматичні вуглеводні - джерело канцерогенної небезпеки (Піковський, 1993).

Землевание уповільнює процеси розкладання нафтових вуглеводнів, призводить до утворення внутріпочвенного потоків нафти, пластової рідини і забруднення грунтових вод. Складування забрудненого ґрунту створює вогнища вторинного забруднення.

Якісне видалення нафтових забруднювачів при високих рівнях забруднення часто не обходиться без застосування різного роду сорбентів. Серед можливого сировини для виробництва сорбентів найбільш привабливими є природне органічна сировина і відходи виробництва рослинного походження. До такого сировини відносяться торф, сапропелі, відходи переробки сільськогосподарських культур та ін. На базі такої сировини розроблені, наприклад, такі сорбенти, як «Сорбест», «РС», «Лессорб» та ін. (Колесниченко, 2004).

Існує технологія очищення грунтів і грунтових вод шляхом промивання їх поверхнево-активними речовинами. Цим способом можна видалити до 86% нафти і нафтопродуктів. Застосовувати його в широких масштабах навряд чи доцільно, тому що поверхнево-активні речовини самі забруднюють середовище і з'явиться проблема їх збирання та утилізації (Піковський, 1993).

3.2 Основні підходи і роль биоремедиации у відновленні нафтозабруднених грунтів

Існуючі механічні, термічні та фізико-хімічні методи очищення грунтів від нафтових забруднень дорогі і ефективні тільки при певному рівні забруднення (як правило, не менше 1% нафти в грунті), часто пов'язані з додатковим внесенням забруднення і не забезпечують повноти очищення. В даний час найбільш перспективним методом для очищення нафтозабруднених ґрунтів, як в економічному, так і в екологічному плані є біотехнологічний підхід, заснований на використанні різних груп мікроорганізмів, що відрізняються підвищеною здатністю до біодеградації компонентів нафт і нафтопродуктів (Логінов та ін., 2000). Здатність утилізувати трудноразлагаемих речовини антропогенного походження (ксенобіотики) виявлена ??у багатьох організмів. Ця властивість забезпечується наявністю у мікроорганізмів специфічних ферментних систем, що здійснюють катаболізм таких з'єднань. Оскільки мікроорганізми мають порівняно високий потенціал руйнування ксенобіотиків, виявляють здатність до швидкої метаболічної перебудови та обміну генетичним матеріалом, їм надається велике значення при розробці шляхів биоремедиации забруднених об'єктів.

Під терміном «Біоремедіація» прийнято розуміти застосування технологій і пристроїв, призначених для біологічного очищення грунтів, тобто для видалення з грунту вже знаходяться в ній забруднювачів (Біологія. Великий енциклопедичний ..., 1999). Біоремедіація включає в себе два основних підходи:

1 біостимуляція - активізація деградуючою здатності аборигенної мікрофлори внесенням біогенних елементів, кисню, різних субстратів;

2 біодополненіе - інтродукція природних і генноінженерних штамів-деструкторів чужорідних сполук.

Біостимуляція in siti (біостимуляція в місці забруднення). Цей підхід заснований на стимулюванні зростання природних мікроорганізмів, що мешкають в забрудненому ґрунті і потенційно здатних утилізувати забруднювач, але не здатних робити це ефективно через нестачу основних біогенних елементів (сполук азоту, фосфору, калію та ін.) Або несприятливих фізико-хімічних умов. У цьому випадку в ході лабораторних випробувань з використанням зразків забрудненого грунту встановлюють, які саме компоненти і в яких кількостях слід внести в забруднене об'єкт, щоб стимулювати зростання мікроорганізмів, здатних утилізувати забруднювач (Логінов та ін., 2000).

Біостимуляція in vitro. Відмінність цього підходу в тому, що біостимуляція зразків природної мікрофлори забрудненого грунту проводиться спочатку в лабораторних або промислових умовах (у біореакторах або ферментерах). При цьому забезпечується переважний і виборчий зростання тих мікроорганізмів, які здатні найбільш ефективно утилізувати даний забруднювач. «Активізувати» мікрофлору вносять у забруднене об'єкт одночасно з необхідними добавками, що підвищують ефективність утилізації забруднювача (Логінов та ін., 2000).

Існуючі два шляхи інтенсифікації біодеградації ксенобіотиків у навколишньому середовищі - стимуляція природної мікрофлори і інтродукція активних штамів, не тільки не суперечать, а й доповнюють один - одного (Коронеллі, 1996).

Биорекультивация нафтозабруднених ґрунтів - це багатостадійний біотехнологічний процес, що включає фізико-хімічні методи детоксикації забруднювача, застосування органічних і мінеральних добавок, використання біопрепаратів (Вельков, 1995).

Основними факторами, що впливають на хід біоруйнування органічних забруднювачів, є їх хімічна природа (яка обумовлює можливі шляхи біотрансформації), концентрація і взаємодія з іншими забруднювачами (на рівні їх безпосередньої взаємодії або взаємного впливу на трансформацію).

До несприятливих фізико-хімічних умов, лімітуючим деградацію мікроорганізмами ксенобіотиків у навколишньому середовищі, можна віднести низьку або надмірну вологість грунту, недостатній вміст кисню, несприятливу температуру і рH, низьку концентрацію або доступність ксенобіотиків, наявність альтернативних, більш бажаних субстратів і т.д .. Серед біологічних факторів відзначені поїдання інтродуціруемих мікроорганізмів найпростішими, обмін генетичною інформацією в популяції, фізіологічний стан і щільність інтродуціруемих мікробної популяції (Providenti, 1993). Деякі з перерахованих проблем можуть бути вирішені шляхом створення генетично сконструйованих штамів-деструкторів та їх консорціумів, удосконалення методів інтродукції, оптимізації умов існування природних мікробних популяцій.

Таким чином, інтродукція мікроорганізмів приводить до позитивних результатів тільки при створенні відповідних умов для розвитку внесеної популяції, для чого необхідно знати фізіологічні особливості інтродуцента, а також враховувати складаються мікробні взаємодії.

3.3 Мікроорганізми-деструктори нафти і нафтопродуктів

Здатність засвоювати вуглеводні нафти притаманна мікроорганізмам, представленим різними систематичними групами. До них відносяться різні види мікроміцетів, дріжджів і бактерій. Найбільш активні деструктори нафти зустрічаються серед бактерій. Вони характеризуються здатністю до засвоєння широкого спектру вуглеводнів, включаючи і ароматичні, володіють високою швидкістю росту і, отже, становлять великий практичний інтерес.

Углеводородокисляющих група мікроорганізмів природного походження таксономически дуже різноманітна. Найбільш активні бактеріальні штами відносяться до пологів: Pseudomonas, Arthrobacter, Rhodococcus, Acinetobacter, Flavobacterium, Corynebacterium, Xanthomonas, Alcaligenes, Nocardia, Brevibacterium, Mycobacterium, Beijerinkia, Bacillus, Enterobacteriaceae, Klebsiella, Micrococcus, Sphaerotilus. Серед актиноміцетів увагу привертає численний рід Streptomyces. З дріжджів виділяють рід Candida і Torulopsis (Сидоров та ін., 1997).

Постійними і домінуючими компонентами природних біоценозів нафтових забруднень є родокока, їх основна екологічна функція - акумуляція газоподібних н-алканів, рідких вуглеводнів нафти і трансформація їх у біомасу. Бактерії цього роду відрізняються високою життєстійкістю при дії несприятливих факторів - низької температури, сонячного ультрафіолету, тривалої відсутності поживних речовин. Природна нафтоокислюючих мікрофлора нефтезагрязнений тундрової грунту представлена ??головним чином бактеріями R. Erythropolis. У зв'язку з цим зрозумілий інтерес до родокока - деструкторів нафти (Коронеллі, 1996).

Т. В. Коронеллі із співавт. з метою вибору штаму, що зберігає найбільшою мірою углеводородокисляющих активність при низьких температурах, провели скринінг всієї колекції углеводородокисляющих бактерій (пологи Pseudomonas, Arthrobacter, Rhodococcus) в агаризованому середовищі з парафіном при температурі плюс 6 ° С. Відібрані таким чином 17 штамів вирощували в рідкому середовищі з нафтою при плюс 8 ° С. Через 14 діб визначали концентрацію нафтових вуглеводнів методом ІЧ-спектроскопії. Виявилося, що 12 штамів використовували від 13 до 36% внесеної нафти, два штами - 5-6%, а три були неефективними. Усі 12 штамів були представниками роду Rhodococcus: 11 належали до виду R. Erythropolis; один - до виду R. Maris (Коронеллі, 1996).

Чималий інтерес представляють спороутворюючі бактерії, так як вони найбільш стійкі до різних несприятливих впливів навколишнього середовища.

В даний час активно ведеться пошук мікроорганізмів, що руйнують нафту, особливо при низьких температурах. Активні форми мікроорганізмів виділяються з різноманітних водних і ґрунтових екосистем, особливо забруднених вуглеводнями або нафтою, а також з мікрофлори нафти і пластових вод нафтових родовищ.

Вибір активного мікроорганізму-деструктора вуглеводневих забруднень повинен проводитися з урахуванням ряду вимог. При пошуку мікроорганізму-деструктора необхідно враховувати, що вноситься в ґрунт мікробна біомаса не повинна бути чужорідної для ґрунтової мікрофлори. Ще одним важливим вимогою до внесеним в грунт мікроорганізмам є їх непатогенних. У зв'язку з тим, що технологія мікробіологічного очищення забруднених грунтів передбачає аеробні умови, необхідно вести вибір мікроорганізму-деструктора серед аеробних і факультативно-анаеробних мікроорганізмів. Мікробні клітини можуть піддаватися впливу несприятливих факторів навколишнього середовища, отже, мікроорганізм-деструктор повинен володіти високою життєстійкістю.

В даний час запропоновано велику кількість різних комерційних мікробіологічних препаратів як вітчизняного, так і імпортного виробництва. Ряд з них знайшов широке застосування на практиці (Деворойл, Дестройл, Путідойл і т.п.)

Інститут мікробіології АН Росії спільно з Науково - виробничим підприємством «Биотехинвест» розроблений мікробіологічний препарат «Деворойл». Препарат призначений для біодеградації нафти і нафтопродуктів при забрудненні ґрунтів, водойм, поверхонь акваторій, а також внутрішніх поверхонь танків нафтоналивних суден та інших резервуарів.

Мікробіологічний препарат «Деворойл» складається з ретельно підібраного спільноти углеводородоокісляющіх бактерій і дріжджів. До складу асоціації входять вегетативні клітини непатогенних штамів культур пологів Rhodococcus, Pseudomonas і Yarovvia. Бактерії здатні окисляти нафтові n - алкани довжиною ланцюга С9 - С30 і ароматичні вуглеводні. Вдало підібрана асоціація мікроорганізмів дає препарату безліч принципових переваг.

Також для ліквідації нафтових забруднень ґрунту використовується препарат «Дестройл». Комерційний препарат, що випускається Бердський заводом біологічних препаратів, отриманий на основі виділеної з природи мікробної культури Acinetobacter sp. Володіє високовираженной активністю щодо вуглеводнів нафти і нафтопродуктів, викликаючи в них глибокі незворотні процеси деградації до залишкових продуктів, що відносяться до екологічно нейтральним з'єднанням.

3.4 Трансформація нафти в грунті мікробіологічними препаратом і дощовими хробаками

Вчені Іркутського Державного Університету (Стом, Матвєєва та ін., 2006) проводили дослідження. У лабораторних умовах вивчали вплив дощових черв'яків і нефтеразрушающего мікробіологічного препарату, а також їх бінарної суміші на зразки нефтезагрязнений грунту. Трансформація нафтового забруднення, зниження фітотоксичності досліджуваних зразків та рекультивація грунту найбільш ефективно відбувається під дією комплексу біодеструкторів.

Було запропоновано для елімінування нефтегенного забруднення спільне застосування нефтеразрушающіх мікробіологічних препаратів і дощових черв'яків. При використанні такого підходу передбачалося збільшення швидкості і ступеня біотрансформації нафтопродуктів, відновлення структури грунту, усунення необхідності додаткової аерації та повторного внесення препарату.

Джерелом мікроорганізмів служив мікробіологічний препарат "Дестройл", рекомендований для очищення грунту від нафти і нафтопродуктів. В якості дощових черв'яків використовували червоний каліфорнійський гібрид дощового черв'яка Eisenia foetida.

Експерименти проводили в садках розміром 180 мм - 120 мм - 60 мм, поміщаючи туди зразки нефтезагрязнений грунту (товщина шару 50 мм). У роботі використовували дерново-підзолисті грунти, в яку додавали нафту Марківського родовища Іркутської області (з розрахунку 25 г нафти на 1 кг ґрунту). В один з досвідчених кошів вносили мікробіологічний препарат "Дестройл" (0,5 г на 100 г нефтезагрязнений грунту), в іншій - дощових черв'яків, а в третій - додавали "Дестройл" спільно з дощовими хробаками. Черв'яків брали однакового віку довжиною 60-70 мм по п'ять особин. Контролем служила нефтезагрязнений грунт, у якому не додавали ні черв'яків, ні «Дестройл».

Кількісний вміст нафти, екстрагованої хлороформом (Аграновіч, 1979), в процесі досвіду визначали на спектрофотометрі СФ - 46, при l = 286 нм (Куркова, Бриль, 1990).

Визначення швидкості вермітрансформаціі грунту хробаками вели за оригінальною методикою (Стом та ін., Патент №96114221). В основі цього методу лежить реєстрація товщини шару копролітів накопичуються на поверхні субстрату. Оцінку фітотоксичності водних витяжок з грунтів здійснювали по пробі на проростання насіння редиски (Stom, 1982). Підраховували число пророслого насіння і вимірювали довжину проростків. Кожен досвід проводили не менше ніж з трьома паралелями і в 5 біологічних повторностях.

Як видно з малюнка 3.1 додавання в грунт хробаків, а ще більшою мірою мікробіологічного препарату суттєво активізувало процеси елімінування нафти в досліджуваних зразках. У міру збільшення тривалості експериментів спостерігали все більш значне зниження вмісту нафти при спільній дії червоного каліфорнійського гібрида і препарату "Дестройл" у порівнянні з дією біодеструкторів порізно. Особливо наочно це виявлялося в сорокасуточних експериментах, коли спостерігалося помітне зниження впливу окремо внесених дощових черв'яків і мікробіологічного препарату.

У варіантах з додаванням черв'яків відзначалося підвищення структурованості грунту, її скважности. Це, без сумніву, має підвищувати аерацію і покращувати водний режим грунту (Орлов, 1978), тим самим, сприяючи фізико-хімічними та мікробіологічними процесам руйнування нафти.

Малюнок 3.1 - Вплив різних біодеструкторів на вміст нафти у ґрунті

Поліпшення процесів руйнування нафти, а також інтенсифікація переробки нафтозабруднених грунтів при додаванні поряд з препаратом "Дестройл" дощових черв'яків, підтверджується і збільшенням товщини шару копролітів (малюнок 3.2) - грудочок землі пропущених через кишечник хробака. Через три тижні, товщина шару копролітів в дослідах, де в грунт додавали нафту (25 г / кг) склала, у варіанті з хробаками - 3 мм, а там, де крім хробаків додавали і мікробіологічний препарат - 9 мм.

Рисунок 3.2 - Товщина шару копролітів на поверхні нафтозабруднених субстратів

Про те, що при дії комплексу біодеструкторів відбувалося значно більш інтенсивне знешкодження нафти, свідчили і дані, отримані при тестуванні на насінні редиски.

З таблиці 3.2 можна побачити, що при спільному впливі мікробіологічного препарату і червоного каліфорнійського гібрида, відбувалося значно більш ефективне зниження фітотоксичності водних витяжок з ґрунту, в яку додавали нафту, ніж в тих випадках, коли компоненти діяли порізно.

Таблиця 3.2 - Вплив біодеструкторів на фітотоксичність водних витяжок з ґрунту, забрудненого нафтою

 Час експозиції, діб Вплив біодеструкторів на фітотоксичність водної витяжки нефтезагрязнений грунту Біодеструктори

 Дощові черв'яки Мікробіологічний препарат Препарат і дощові черв'яки

 10

 кол-во пророслого насіння

 середня довжина проростків

0

0

0

0

0

0

 20 кол-во пророслого насіння середня довжина проростків

0

0

0

0

 20,4

 16,5

 30

 кол-во пророслого насіння

 середня довжина проростків

 3,5

 11,0

 17,0

 33,0

 68,0

 60,5

 40

 кол-во пророслого насіння

 середня довжина проростків

 6,8

 11,0

 17,0

 49,5

 81,6

 88,0

Примітка: Контроль: водна витяжка грунту, в яку не вносили нафту; кол-во пророслого насіння - 29; середня довжина проростків, мм - 57; вихідна концентрація нафти в 1 кг ґрунту - 25 г.

Через 30 діб від початку експерименту у варіантах з водними витяжками, з нафтозабруднених грунтів, в які запускали червоних каліфорнійських черв'яків, проростало всього 3,5% насіння, там де був доданий «Дестройл» - 17%, а там де були присутні і черв'яки і мікробіологічний препарат - 68%. Довжина проростків редису через 30 діб склала відповідно 11,0, 33,0 і 60,5 мм.

Таким чином, проведені дослідження показали, що комплекс біодеструкторів, що складається з представників двох трофічних рівнів - асоціацій нефтеразрушающіх мікроорганізмів - "Дестройл" і дощових черв'яків, більш ефективно елімінувати нафту з нафтозабруднених грунтів, знижував фітотоксичність зразків, і вів до рекультивації грунтів, ніж названі біодеструктори це робили окремо.

Ця робота продовжується і далі, розглядається хімічна сторона.

3.5 Методи рекультивації, засновані на інтенсифікації процесів самоочищення

Самоочищення і самовідновлення ґрунтових екосистем, забруднених нафтою і нафтопродуктами, - це стадійний біогеохімічний процес трансформації забруднюючих речовин, пов'язаний з стадійним процесом відновлення біоценозу. Для різних природних зон тривалість окремих стадій цих процесів різна, що пов'язано в основному з грунтово-кліматичними умовами. Важливу роль відіграють і склад нафти, наявність супутніх солей, початкова концентрація забруднюючих речовин (Ісмаїлов та ін., 1998).

Механізм самовідновлення екосистеми після нафтового забруднення досить складний. За допомогою агротехнічних прийомів можна прискорити процес самоочищення нафтозабруднених грунтів шляхом створення оптимальних умов для прояву потенційної активності мікроорганізмів, що входять до складу природного мікробіоценозу.

Одним з основних факторів, що лімітують процес розкладання вуглеводнів, є газоповітряний режим забрудненого грунту. Нафтове забруднення погіршує газовий обмін грунту, створює умови для посилення відновних процесів. Для окислення вуглеводнів мікроорганізмами необхідна наявність молекулярного кисню, в анаеробних умовах процес окислення украй утруднений.

З понад 100 видів бактерій, грибів, дріжджів, здатних утилізувати один або кілька нафтових вуглеводнів в якості джерела вуглецю та енергії, тільки один належав до анаеробам (Колесниченко, 2004). Прийоми обробки ґрунтів, сприяють поліпшенню аерації, стимулюють активність мікроорганізмів, посилюють окисні процеси. Інтенсифікація розкладання нафти і нафтопродуктів у грунті можлива шляхом розпушування, частої оранки, дискування.

Обробка є потужним регулюючим фактором, що стимулює самоочистку нафтозабруднених грунтів. Вона позитивно впливає на мікробіологічну та ферментативну активність, так як сприяє поліпшенню умов життєдіяльності аеробних мікроорганізмів, які кількісно і по інтенсивності метаболізму домінують у ґрунтах і є основними деструкторами вуглеводнів. Розпушування забруднених грунтів збільшує дифузію кисню в грунтові агрегати, знижує концентрацію вуглеводнів у грунті в результаті випаровування легких фракцій, забезпечує розрив поверхневих пір, насичених нафтою, але в той же час сприяє рівномірному розподілу компонентів нафти і нафтопродуктів у грунті і збільшенню активної поверхні. Обробка грунту створює потужний біологічно активний шар з поліпшеними агрофізичними властивостями. У грунті при цьому створюється оптимальний водний, газоповітряний і тепловий режим, зростає чисельність мікроорганізмів і їх активність, посилюється активність ґрунтових ферментів, збільшується енергія біохімічних процесів (Колесниченко, 2004).

Забезпеченість грунтів біогенними елементами - азотом, фосфором і калієм - важливий фактор, що визначає інтенсивність розкладання нафти і нафтопродуктів. Недолік біогенних елементів необхідно заповнювати шляхом внесення в ґрунт мінеральних добрив. Практично у всіх випадках внесення біогенних елементів у вигляді мінеральних добрив стимулює розкладання вуглеводнів у грунті. Найбільш інтенсивно розкладання вуглеводнів протікає при щорічному внесенні комплексу N, P, K - містять добрив у поєднанні з гноєм, а також при внесенні в грунт біогумусу (Андерсон та ін., 1979).

Біогумус отримують переробкою гною (великої рогатої худоби, свинячого, кінського), тирси, подрібненої Вермикультура соломи. Біогумус підтримує високу чисельність бактерій, що утилізують органічні і мінеральні форми азоту, целлюлозоразрушающіх мікроорганізмів, нітріфікатов. Сприяє розбудові мікробного ценозу нефтезагрязнений грунту, що проявляється в розширенні видового різноманіття бактеріальної флори. Ґрунтова мікрофлора використовує компоненти біогумусу в якості джерела азоту, фосфору і калію, забезпеченість якими в нефтезагрязнений грунті знижується. Багато органічні речовини біогумусу служать енергетичним матеріалом для грунтової мікрофлори, завдяки чому в грунті підвищується активність мікробіологічних процесів, відповідно посилюється мобілізація поживних речовин (Логінов, 2000).

Температура - важливий фактор, за інших рівних умов визначає інтенсивність мікробіологічного розкладання нафти і нафтопродуктів. Оптимальною температурою для розкладання нафти і нафтопродуктів у грунті вважається 20-37 ° С. У грунтах, розташованих в аридних зонах з підвищеною середньорічною температурою, інтенсивність самоочищення забруднених грунтів значно вище, ніж у ґрунтах, розташованих в гумідних зонах з відносно низькими середньорічними температурами.

З причини сильного впливу температури на швидкість біодеградації нафтопродуктів особливу увагу дослідників останнім часом привертають природні мікроорганізми, що володіють високою стійкістю до низьких температур. Зокрема, із забруднених нафтопродуктами грунтів Антарктики був виділений штам Pseudomonas sp. 30-3, здатний переносити діапазон температур від 0 до 35 ° С (Panicker et al., 2002).

Підтримання грунту у вологому стані є одним з агротехнічних прийомів управління біологічною активністю і надає ефективну дію на темпи розкладання нафти і нафтопродуктів. Сприятливий водний режим грунту досягається шляхом поливу. Поліпшення водного режиму шляхом поливу обумовлює поліпшення агрохімічних властивостей ґрунтів, зокрема впливає на рухливість поживних речовин, мікробіологічну діяльність і активність біологічних процесів. Одночасно з цим посилюється дія на мікробіологічну та ферментативну активність агрохімічних прийомів, наприклад внесення добрив, розпушування.

Кислотність ґрунту відіграє важливу роль в розкладанні нафти і нафтопродуктів. Значення рН, близькі до нейтральних, є оптимальними для росту на вуглеводнях більшості бактеріальних мікроорганізмів. У підзолистих грунтах з кислою реакцією цей фактор має вирішальне значення при розкладанні нафти і нафтопродуктів. Тому для створення рН, оптимального для їх биоразложения, кислі грунти піддають вапнування (Колесниченко, 2004).

Посів на нафтозабруднених грунт люцерни та інших бобових культур, трав з розгалуженою кореневою системою сприяє прискоренню розкладання вуглеводнів (Алієв та ін., 1977). Позитивний вплив посівів сільськогосподарських рослин, і зокрема багаторічних трав, пояснюється тим, що своєю розвиненою кореневою системою вони сприяють поліпшенню газовоздушного режиму забрудненого ґрунту, збагачують грунт азотом і біологічно активними сполуками, які виділяються кореневою системою в грунт в процесі життєдіяльності рослин. Все це стимулює ріст мікроорганізмів і відповідно інтенсифікує розкладання нафти і нафтопродуктів.

Висновок

Забруднення грунтів нафтою та нафтопродуктами - одна із складних і багатопланових проблем екології та охорони навколишнього середовища. В даний час успішно розвиваються технології біоремедіації нафтозабруднених територій. При цьому рішення проблеми досягається за рахунок стимуляції мікробних ценозів шляхом внесення добрив, мікроорганізмів, які здатні найбільш ефективно утилізувати даний забруднювач або шляхом внесення різних біопрепаратів.

Єдиним реальним в даний час способом боротьби з наслідками розливу нафти і нафтопродуктів є комплекс робіт, що включає механічне або фізико-хімічне видалення розлитих нафтопродуктів з подальшим очищенням що залишається в грунті нафти біологічними методами за допомогою біодеструкції нафтоокислюючих мікроорганізмами.

У той же час існуючі в даний час в Росії препарати виявляються недостатньо ефективними в різних екстремальних грунтово-кліматичних умовах різних регіонів Росії, у зв'язку з чим для ліквідації масштабних наслідків розливів нафти в даний час необхідний активний пошук і виділення аборигенних штамів та розробка нових препаратів.

Однак необхідно відзначити, що природні аборигенні мікроорганізми володіють обмеженою нафтоокислюючих активністю, незважаючи на більш високу стійкість до впливу факторів зовнішнього середовища. Тому можливим перспективним рішенням є розробка нових, що не існують в природі видів мікроорганізмів. Ці нові види, що володіють як мінімум на порядок вищою нафтоокислюючих активністю, повинні створюватися обов'язково з штучним обмеженням терміну життя з метою запобігання биогенной катастрофи.

Розроблені та активно впроваджуються велика кількість комерційних мікробіологічних препаратів іноземного та вітчизняного виробництва, таких як «Дестройл», «Путідойл», «Деворойл» та ін. Однак у природних умовах біодеградація протікає під впливом всього комплексу грунтової біоти, невід'ємною частиною якої є і дощові черв'яки . У зв'язку з цим можна було припустити, що вермікультури виявиться перспективною і для інтенсифікації переробки нафтозабруднених матеріалів.

Проведені дослідження показали, що комплекс біодеструкторів, що складається з представників двох трофічних рівнів - асоціації нефтеразрушающіх мікроорганізмів - "Дестройл" і дощових черв'яків, більш ефективно елімінувати нафту з нафтозабруднених грунтів і знижував фітотоксичність досліджуваних зразків, ніж у випадку їх роздільного внесення.

Проблема нафтового забруднення грунтів в даний час в нашій країні практично не вирішується. Роботи з очищення нафтових забруднень з використанням мікроорганізмів не координуються, їх науковий і технологічний рівень невисокий. Таки чином, проблема забруднення нафтою і нафтопродуктами грунтів Російської Федерації стоїть в даний час як ніколи гостро і для пошуку шляхів вирішення всіх її аспектів необхідна координована концентрація зусиль усіх зацікавлених урядових, наукових та виробничих організацій.

Список використаних джерел

1 Абросимов А.А. Екологія переробки вуглеводневих систем / Под ред. М. Ю. Доломатова, Е. Г. Теляшева.-М .: Хімія, 2002.-608 с.

2 Алієв С.А. Рекомендації щодо рекультивації нафтозабруднених земель / Гвозденко Д.В., Бабаєв М.П., ??Гаджієв Д.А.- Баку: Елм, 1981.-26 с.

3 Андресон Р.К. Вивчення факторів, що впливають на біорозпад нафти в грунті / Р.К. Андресон, Л.А. Пропадущая // Корозія і захист в нафтогазовидобувній промишленності.- М., 1979.- №3.- С. 30-32.

4 Берні Ф.Ж. Водоочистка / Ф. Берньє, Ж. кордонів. - М .: Хімія, 1997. - 288 с.

5 Біологія. Великий енциклопедичний словник / Гол. ред. М.С. Гіляров. - 3-е изд. - М .: Велика Російська енциклопедія, 1999. - 864 с.

6 Бочарнікова Е.Д. Вплив нафтового забруднення на властивості сіро-бурих грунтів Апшерону і сірих лісових грунтів Башкирії / О.Д Бочарнікова // Автореф. Дис. ... Канд. біол. наук.- М .: 1990.-16 с.

7 Вельков В.В. Біоремедіація; принципи, проблеми, підходи / В.В. Вельков // Біотехнологія.- 1995.- № 3-4.- С. 20-27.

8 Відновлення нафтозабруднених грунтових екосистем / Под ред. М.А. Глазковской.- М. Наука, 1988.- 264 с.

9 Власов А.В. Боротьба з втратами нафтопродуктів при транспортуванні і зберіганні (аналіз і оцінка втрат) / А.В. Власов - М .: ЦНІІТЕнефтехім, 1994.- 50 с.

10 Гольдберг В. М. Техногенне забруднення природних вод вуглеводнями і його екологічні наслідки / В.М. Гольдберг, В.П. Звєрєв, А.І. Арбузов, и др М .: Наука, 2001.-125с

11 Державний доповідь про стан та про охорону навколишнього середовища Іркутської області в 2003 році. - Іркутськ: Вид-во «Облмашінформ», 2004.-296 с.

12 Гриценко А.І. Екологія. Нафта і газ / А.І. Гриценко, Г.С. Акопов, В.М. Максимов. - М .: Наука, 1997.-598 с.

13 Давидова С.Л. Нафта як паливний ресурс і забруднювач навколишнього середовища / С.Л. Давидова, В.І. Тагасов. - М .: Изд-во РУДН, 2004. - 131 с.

14 Дінка В.А. Високонадійний трубопровідний транспорт / В.А. Дінка, О.М. Іванцов // Будівництво трубопроводов.- М .: ТОЙ, 1994.- С. 5-9.

15 Єрусалимський Н.Д. Дослідження мікрофлори стічних вод нефтеперераб-Тива підприємств / Н.Д. Єрусалимський, Е.А. Андрєєва, Е.Л. Гришанкова, Е.Л. Головлев, В.В. Дорохов, Л.Н. Жукова // Прикладна біохімія та мікробіологія. - 1965.- № 2.-С.163-166.

16 Ісмайлов Н.І. Сучасний стан методів рекультивації нафтозабруднених земель / Н.І. Ісмайлов, Ю.І. Піковський // Відновлення нафтозабруднених грунтових екосістем.- М .: Наука, 1988.-С. 222-236.

17 Кірєєва Н.А. Біологічна активність нафтозабруднених грунтів / Н.А. Кірєєва, В.В. Водоп'янов, А.М. Міфтахова. - Уфа Гілем, 2001.

18 Кірєєва Н.А. Діагностичні критерії самоочищення грунтів від нафти / Н.А. Кірєєва, Є.І. Новосьолова, Г.Ф. Ямалетдінова // Екологія і промисловість Росії 2001 Грудень.

19 Кірєєва Н.А. Фітотоксичність антропогенно-забруднених грунтів / Н.А.Кіреева, Г.Г. Кузяхметов, А.М.Міфтахова, В.В.Водопьянов.-Уфа Гілем, 2003.

20 Кірєєва Н.А. Мікробіологічна оцінка грунту, забрудненого нафтовими вуглеводнями / Н.А. Кірєєва // Баш. Хім. ж.-1995.-2, № 3-4.-С. 65-68.

21 Кірєєва Н.А. Вплив забруднення грунтів нафтою і нафтопродуктами на чисельність і видовий склад мікроміцетів / Н.А. Кірєєва, Н.Ф Галімзянова // Грунтознавство, 1995.- №2, - С.211-216.

22 Кірєєва Н.А. Стан комплексу актиноміцетів нафтозабруднених грунтів / Н.А. Кірєєва // Вест. Баш. Ун-та.-1996.- № 1.-С. 42-45.

23 Колесніченко А.В. Процеси біодеградації в нафтозабруднених ґрунтах / А.В. Колесниченко, А.І. Марченко, Т.П. Побежімова, В.В. Зикова.- Москва: «Промекобезопасность», 2004. - 194 с.

24 Коронеллі Т.В. Принципи і методи інтенсифікації біологічного руйнування вуглеводнів у навколишньому середовищі (огляд) / Т.В. Коронеллі // Прикладна біохімія та мікробіологія.-1996.- 32, № 6.- С.579-585.

25 Куркова З.В. Використання діелькометричний методу для визначення змісту і дисперсності нафтопродуктів в стічній воді / З.В. Куркова, З.М. Бриль, М.М. Гулина // Хімія і технологія води.- 1990.-т.12, № 11. - С.1036-1038.

26 Левін С.В. Еколого-мікробіологічне нормування вмісту нафти в грунті / С.В. Левін, Е.М. Халімов, В.С. Гузєв // Токсикологічний вестнік.-1995.- №1.- С. 11-15.

27 Логінов О.Н. Біотехнологічні методи очищення навколишнього середовища від техногенних забруднень / О.Н. Логінов, Н.Н, силища, Т.Ф. Бойко, Н.Ф. Галімзянова.-Уфа: Держ. вид. науково-тех. літератури «Реактив», 2000. - 100 с.

28 Методика визначення нафтопродуктів у стічних водах виробництв люмінесцентна-хроматографічним методом. - В кн .: Довідник з фізико-хімічних методів дослідження об'єктів навколишнього середовища / Под ред. Г.І. Аграновіч - Л .: Суднобудівник, 1979. - С.87.

29 Мітчел Дж. Акваметрія / Дж. Мітчелл, Д. Сміт М .: Хімія, 1980.-С.600.

30 Орлов Д. С. Екологія та охорона біосфери при хімічному забрудненні / Д.С. Орлов, Л.К. Садовникова, І.М. Лозановская. - М .: Вища. Шк, 2002. - 334 с.

31 Орлов Д.С. Хімія ґрунтів / Д.С. Орлов.- М .: Вища школа, 1978.-с.342.

32 Панов Г. Є. Охорона навколишнього середовища на підприємствах нафтової і газової промисловості / Г.Є. Панов, Л.Ф. Петряшін, Г.Н. Лисяний. - М .: Недра, 1986.- 244 с.

33 Петров А. А. Вуглеводні нафти / А.А. Петров М .: Наука, 1984.-263 с.

34 Піковський Ю.І. Природні та техногенні потоки вуглеводнів у навколишньому середовищі / Ю.І. Піковскій.- М .: Изд-во МГУ, 1993. - 208 с

35 Піковський Ю.І. Проблема діагностики та нормування забруднення ґрунтів нафтою і нафтопродуктами / Ю.І. Піковський, А.Н. Геннадиев, С.С. Чернянський, Г.Н. Сахаров // Почвоведеніе.-№ 9.-2003.-С.1132-1140.

36 Проскуряков В.А. Хімія нафти ігаз / В.А. Проскуряков.- СПб .: Хімія, 1995. - С.448.

37 Реймерс Н.Ф. Природокористування / Н.Ф. Реймерс // Словник-довідник. - М .: Думка, 1990.-637, С.

38 Рокитський П.Ф. Біологічна статистика / П.Ф. Рокітскій.-Мінськ .: Вища школа, 1973. - 318 с.

39 Ржавський Е.А. Шляхи зменшення втрат нефтегрузов при залізничних перевезеннях / Е.А. Ржавський, І.О. Суходольський // Транспорт і зберігання нафти і нефтепродуктов.- М., 1967. -Т.1.-С.29-30.

40 Саксонов М.А. Екологічний моніторинг нафтогазової галузі / М.А. Саксонов, А.Д. Абалаков, Л.В. Данько, О.А. Бархатова, А.Е. Балаян, Д.І. Стом // Фізико-хімічні та біологічні методи. - Іркутськ: Іркут. Ун-т, 2005.-114 с.

41 Сидорова Є.В. Охорона ґрунтів на об'єктах газової промисловості / Є.В. Сидорова, Г.С. Акопова, Н.С. Немкова.- М .: ІРЦ Газпрому, 1994.- 50 с.

42 Сидоров Д.Г. Польовий експеримент з очищення грунтів від нафтового забруднення з використанням углеводородокисляющих мікроорганізмів / Д.Г. Сидоров, І.А. Борзенков, Р.Р. Ібатулін, Є.І. Мілєхін, І.Т. Храмів, С.С. Бєляєв, М.В. Іванов // Прикладна біохімія та мікробіологія.- 1997.- Т.33, №5.- С.497-502.

43 Стом Д.І. Трансформація нафти в найпростіші трофічні ланцюги / Д.І. Стом, Д.С. Потапов, А.Е. Балаян, О.Н. Матвєєва, В.К. Баранская // Проблеми систематики, екології і токсикології безхребетних. - Іркутськ: Вид-во ЯРМУ, 2000.-С. 90-95.

44 Стом Д.І. Експресний метод оптимізації складу середовищ для вермикультивирования / Д.І. Стом, Д.С. Потапов, А.Е. Балаян. - Пріоритетна довідка на патент. - ВНІІГПЕ ЗТД № 20.-№ 96114221.

45 Радянський енциклопедичний словник / За ред. А.М. Прохоров.-М .: «Радянська Енциклопедія», 1981.-1600 с.

46 Трофимов С.С. Системний підхід до вивчення процесу грунтоутворення в техногенних ландшафтах / С.С. Трофимов, А.А. Тітлянова, І.Л. Клевенський // Грунтоутворення в техногенних ландшафтах.- Новосибірськ: Наука, 1979.- с.3-18.

47 Трублаевіч Ж.М. Оцінка токсичності грунтів за допомогою лабораторної культури коллембол Polзогша сапсШа / Ж.М. Трублаевіч, Е.Н. Семенова // Екологія, 1997.-№5.

48 Хімія океану. М .: Наука, 1979. Т.1. Хімія вод океану. 518 с.

49 Шиліна А.І. Моделювання фізико-хімічного перетворення бенз (а) перенала в аерозольній фазі / А.І. Шиліна // Міграція забруднюючих речовин в грунтах і суміжних средах.- Л .: Гідрометіздат, 1985.- С. 128-142.

50 McGill W.W. Soil restoration following oil spils - a review // J. Canad. Petrol. Technol, 1977.-V.16, №2. - Р.60-67.

51 Panicker G., Aislabie J., Saul D., Bej A.K. Cold tolerance of Pseudomonas sp. 30-3 isolated from oil-contaminated soil, Antarctica // Polar Biol, 2002, 25, P 5-11.

52 Stom D.I. Effect of polyphenols on shootand root growth and on seed germination // Biologia Plantarum.- 1982. - Vol. 24, N. 1. - P. 1451-1457 /

Авіація і космонавтика
Автоматизація та управління
Архітектура
Астрологія
Астрономія
Банківська справа
Безпека життєдіяльності
Біографії
Біологія
Біологія і хімія
Біржова справа
Ботаніка та сільське господарство
Валютні відносини
Ветеринарія
Військова кафедра
Географія
Геодезія
Геологія
Діловодство
Гроші та кредит
Природознавство
Журналістика
Зарубіжна література
Зоологія
Видавнича справа та поліграфія
Інвестиції
Інформатика
Історія
Історія техніки
Комунікації і зв'язок
Косметологія
Короткий зміст творів
Криміналістика
Кримінологія
Криптологія
Кулінарія
Культура і мистецтво
Культурологія
Логіка
Логістика
Маркетинг
Математика
Медицина, здоров'я
Медичні науки
Менеджмент
Металургія
Музика
Наука і техніка
Нарисна геометрія
Фільми онлайн
Педагогіка
Підприємництво
Промисловість, виробництво
Психологія
Психологія, педагогіка
Радіоелектроніка
Реклама
Релігія і міфологія
Риторика
Різне
Сексологія
Соціологія
Статистика
Страхування
Будівельні науки
Будівництво
Схемотехніка
Теорія організації
Теплотехніка
Технологія
Товарознавство
Транспорт
Туризм
Управління
Керуючі науки
Фізика
Фізкультура і спорт
Філософія
Фінансові науки
Фінанси
Фотографія
Хімія
Цифрові пристрої
Екологія
Економіка
Економіко-математичне моделювання
Економічна географія
Економічна теорія
Етика

8ref.com

© 8ref.com - українські реферати


енциклопедія  бефстроганов  рагу  оселедець  солянка