Головна
Банківська справа  |  БЖД  |  Біографії  |  Біологія  |  Біохімія  |  Ботаніка та с/г  |  Будівництво  |  Військова кафедра  |  Географія  |  Геологія  |  Екологія  |  Економіка  |  Етика  |  Журналістика  |  Історія техніки  |  Історія  |  Комунікації  |  Кулінарія  |  Культурологія  |  Література  |  Маркетинг  |  Математика  |  Медицина  |  Менеджмент  |  Мистецтво  |  Моделювання  |  Музика  |  Наука і техніка  |  Педагогіка  |  Підприємництво  |  Політекономія  |  Промисловість  |  Психологія, педагогіка  |  Психологія  |  Радіоелектроніка  |  Реклама  |  Релігія  |  Різне  |  Сексологія  |  Соціологія  |  Спорт  |  Технологія  |  Транспорт  |  Фізика  |  Філософія  |  Фінанси  |  Фінансові науки  |  Хімія

Вітамін С: структура, хімічні властивості, значення - Хімія

1 Відкриття вітаміну с і встановлення його структури

1.1 Виділення

Роки після закінчення першої світової війни були ознаменовані бурхливим розвитком робіт, спрямованих на виділення невловимого вітаміну. І в США, і в Європі розгорнулася справжня гонка, в фіналі якої переможця очікували величезний науковий престиж і солідна фінансова підтримка. Соломон Цільва і його група в Лістеровском інституті гарячково намагалися виділити вітамін С з концентрованих цитрусових соків. І хоча отриманий ними препарат володів сильним антіскорбутного дією, всі спроби отримати чисте кристалічна речовина залишалися марними. Крах надій зазнала також і провідна американська група під керівництвом Чарльза Кінга з Пітсбургського університету. Основним каменем спотикання було те, що вітамін С, будучи углеводоподобним речовиною, дуже важко піддавався очищенню від інших вуглеводів, присутніх в концентрованих фруктових соках. І тут, незважаючи на копітку і самовіддану роботу названих груп, за іронією долі на сцені з'явився нікому не відомий угорський вчений Альберт Сент-Дьёрдьі.

Абсолютно без грошей, але збагачений цінним досвідом, в 1922 р Сент-Дьёрдьі опинився в датському університетському місті Гронінген, де отримав посаду асистента професора фізіології X. Дж. Хамбергера. Завдяки своєму гострому чуттю він буквально відчув здавалася неймовірною зв'язок між пігментацією шкіри пацієнтів, які страждають на хворобу Аддісона (викликаної порушенням функції надниркових залоз), і потемнінням свіжого зрізу картоплі, яблука і груші. Було відомо, що таке потемніння викликане порушенням окислювально-відновного процесу. Апельсини і лимони темніють на зрізі, і в їх соку, а пізніше в соку капусти Сент-Дьёрдьі виявив сильний відновник. Присутність аналогічного речовини було виявлено їм і в екстракті кори надниркових залоз корови. Далі Сент-Дьёрдьі вирішив виділити це з'єднання, яке, як він вважав, могло виявитися новим гормоном надниркових залоз.

Після нетривалої і безуспішної спроби виділення, розпочатої в Лондонській лабораторії сера Генрі Дейла на початку 1925, він повернувся в Гронінген. Не знайшовши спільної мови з новим керівництвом, Сент-Дьёрдьі відіслав сім'ю назад в Будапешт, а сам відмовився від посади і пройшов через період глибокої депресії. Незабаром, проте, йому посміхнулася удача. На конференції в Стокгольмі він зустрівся з нині всесвітньо відомим біохіміком професором Фредеріком Хопкінсом, якому сподобалася одна з його статей. Результатом цієї зустрічі стало запрошення працювати в Кембриджі. Сент-Дьёрдьі виписав сім'ю і цілком поринув у роботу, яка зробила згодом йому ім'я. Після багатьох розчарувань нарешті вдалося накопичити менш грама білуватого кристалічної речовини з кори надниркових залоз великої рогатої худоби, де воно містилося в дуже незначних кількостях (близько 300 мг / кг вихідного матеріалу), а пізніше з апельсинового і капустяного соків. Процес виділення "восстанавливающего фактора" полягав у наступному:

1. Заморожені наднирники подрібнювали і екстрагували метанолом, пропускаючи вуглекислий газ для запобігання контакту з киснем повітря.

2. Відновлюючий фактор висаджували з профільтрованого екстракту додаванням розчину ацетату свинцю.

3. Осад суспендованих у воді і додавали сірчану кислоту ..

При цьому випадав осад сульфату свинцю, а відновлюючий фактор залишався в розчині.

4. Фільтрат упаривали під вакуумом.

5. Сухий залишок знову екстрагували метанолом і повторялістадіі 2, 3 і 4.

6. Сухий залишок розчиняли в ацетоні, і при додаванні надлишку петролейного ефіру поступово випадали кристали восстанавливающего фактора.

Як типовий відновник, отримане речовина знебарвлюється йод, і виходячи з сумарної маси продуктів реакції, був зроблений висновок, що відносна молекулярна маса сполуки дорівнює 88,2 або кратна цьому значенню. Молекулярна маса, знайдена методом зниження тиску парів води, склала близько 180, що відповідало точному значенням 176,4. І, нарешті, елементний аналіз дав 40,7% вуглецю, 4,7% водню і 54,6% кисню, що дозволило остаточно вивести формулу С6Н8О6.

Хопкінс наполягав на публікації цієї роботи, вважаючи, що Сент-Дьёрдьі виділив і охарактеризував новий гормон вуглеводної природи з кислотними властивостями. Однак при здачі статті до друку виникли ускладнення. Справа в тому, що Сент-Дьёрдьі з пустощів назвав нове з'єднання "ignose" (nose - ніс), що, за його задумом, мало означати речовина вуглеводної природи з невідомою структурою. Ця назва була відкинута редакцією, тоді Сент-Дьёрдьі представив новий варіант "Godnose" (в буквальному перекладі Божий ніс). І тільки коли розсерджений редактор пригрозив, що стаття не буде опублікована до тих пір, поки не буде вибрано відповідну назву, Сент-Дьёрдьі здався і прийняв пропозицію редакції присвоїти новому з'єднанню назву "гексуронові кислота". Отже, в 1928 р в Biochemical Journal ця основоположна робота побачила світ. Безсумнівно, що цей кумедний анекдот неодноразово спливав в пообідніх бесідах. Цікаво відзначити, що в статті Сент-Дьёрдьі висловлював припущення про те, що відновлюють властивості фруктових соків можуть бути також обумовлені присутністю гексуронові кислоти. Ще трохи - і істина була б встановлена, проте ідея про те, що у всіх випадках ми маємо справу з одним і тим же всюдисущим речовиною, вже носилася в повітрі.

У наступному році Сент-Дьёрдьі відвідав США, де провів деякий час в клініці Мейо в Рочестері, шт. Міннесота. Численні бойні в околицях Рочестера поставляли в достатку свіжі наднирники, і йому вдалося напрацювати 25 г гексуронові кислоти, що становило незліченне багатство. Половина цієї кількості була негайно відправлена в Англію в

Бірмінгем професору Норману Хеуорсу для структурних досліджень. На жаль, цієї кількості виявилося недостатньо для встановлення структури, яка так і залишилася в той раз таємницею.

Здавалося, що протягом усього життя Сент-Дьёрдьі супроводжувала удача бути в потрібному місці в потрібний час. Так виявилося і цього разу. Настало запрошення міністра освіти Угорщини дало йому можливість з тріумфом повернутися на батьківщину, і влітку 1930 Сент-Дьёрдьі вступив на посаду професора медичної хімії в Сегеді, розташованому в ста милях на південь від Будапешта. Він швидко здобув репутацію неортодоксального і доступного керівника, однаково коханого і колегами, і студентами. Роком пізніше провідний співробітник групи професора Кінга з Пітсбурга Джо Свірблі повернувся на батьківщину і теж почав працювати в Сегеді. Думка про те, що його білуваті кристали можуть виявитися вітаміном С, все більше і більше опановувала Сент-Дьёрдьі, але вітаміни не входили в коло його наукових інтересів, і, крім того, він ненавидів клінічні випробування. Приїзд Свірблі дозволив всебічно перевірити цю ідею, і до весни 1932 була встановлена повна ідентичність гексуронові кислоти і вітаміну С.

1.2 Встановлення структури

На цей раз бірмінгемська група мала у своєму розпорядженні достатню кількість кристалів. Були відомі молекулярна формула сполуки (С6H8O6), точка плавлення (191 ° С) і кут оптичного обертання (+ 23 ° у воді). Проте розшифровка структури зажадала захоплюючою, майже детективної роботи, так характерної для органічної хімії в ті легендарні роки. Відповідальність за роботу була покладена на Едмунда Херста, який працював під керівництвом Хеуорса ще в Даремі.

При кип'ятінні в соляній кислоті кристали давали фурфурол з кількісним виходом, що свідчило про те, що принаймні п'ять із шести атомів вуглецю утворюють неразветвленную ланцюг. Подальші досліди показали, що аскорбінова кислота є слабкою одноосновной кислотою і сильним відновником. Перша стадія окислення, яка легко оборотна, може бути проведена за допомогою водного розчину йоду, підкисленого бензохинона, або молекулярного кисню в присутності солей міді при рН 5. Продукт окислення, яке призводило до отщеплению двох атомів водню, був названий дегидроаскорбиновой кислотою (С6Н6Об) - оборотне окислення йодом протікало аналогічно відомої реакції з 2,3-дігідроксімалеіновой кислотою:

НООСС (ОН) = С (ОН) СООН + I2 > НООССО - СОСООН + 2HI

що дозволяло припустити наявність ендіольной угруповання С (ОН) = С (ОН). Подібність у спектрах поглинання аскорбінової

Рис. 1. Реакції ендіольной угруповання.

і дегідроксімалеіновой кислот з єдиною інтенсивної смугою при 245 нм підтвердило це припущення. Надалі присутність ендіольной угруповання було доведено наступним чином: 1) при обробці діазометаном виходила діметіласкорбіновая кислота; 2) взаємодія з фенилгидразином після початкового окислення призводило до утворення озазона (рис. 3.1). Спочатку кислотні властивості аскорбінової кислоти приписувалися наявності карбоксильної групи. Однак було показано, що дегидроаскорбиновая кислота - це нейтральний лактон, який повільно гідролізується, вивільняючи карбоксильну групу. Легкість взаємних перетворень дегидроаскорбиновой і аскорбінової кислот вказувала на те, що

остання також є лактоном. Ця точка зору підкріплювалася і тим фактом, що діметіласкорбіновая кислота, будучи нейтральним з'єднанням, при обробці гідроксидом натрію дає натрієву сіль без відщеплення метильної групи, т. Е. Відбувається розкриття лактонного кільця (рис. 3.2).

Крім того, було відомо, що в молекулі присутні ще дві спиртові ОН-групи, які при обробці ацетоном утворюють похідне ізопропілідена, також містить два енольних гідроксилу. Подальше окислення дегидроаскорбиновой кислоти гіпоіодітом натрію в лужному середовищі призводить до утворення щавлевої і L-треонінових кислот, причому остання була ідентифікована за її послідовним перетворенням у відомі зі сполуки - L-діметоксісукцінамід і три-О-метил-ь-треонамід. Описані перетворення допомогли встановити стереохимической спорідненість природного L-аскорбінової кислоти і вуглеводів L-ряду, а також з'ясувати, що карбонильная група лактона сусідить безпосередньо з ендіольной угрупованням (рис. 3.3). Тепер необхідно було з'ясувати розмір лактонного кільця, і це вдалося зробити в результаті ще одного простого експерименту. Було відомо, що при обробці діазометаном L-аскорбінова кислота перетворюється в ді-О-метильних похідне. Подальше метилирование іодметаном в присутності оксиду срібла призводить до утворення тетра-О-метилованого сполуки, озоноліз якого дає єдиний продукт - нейтральний ефір. Під дією аміаку в метанолі ефір деградує з утворенням аміду щавлевої кислоти і 3,4-ді-О-метил-Ь-треонаміда; останній був ідентифікований за характерною для 2-гідроксіамідов реакції Веерман. Так було показано, що лактоном кільце замикається по положенню С-2 треонаміда, еквіеквівалентного положенню С-4 тетра-О-метіласкорбіновой кислоти (рис. 3.4). Таким чином було встановлено, що аскорбінова кислота є 7-лактоном, який зображений на рис. 3.5.

Треба відзначити, що в розчині в невеликих кількостях можуть бути присутні й інші таутомерні форми. Асиметричний центр при С-5 має L- конфігурацію (або S-конфігурацію згідно системі Кана - Інгольд - Прелога). Кислотні властивості розчину аскорбінової кислоти зумовлені іонізацією ендіольного гідроксилу при С-3 (рКа 4,25), що призводить до делокалізації негативного заряду в образующемся аніоні.

1.3 Уточнення структури за допомогою інструментальних методів

Розвиток і вдосконалення спектроскопічних методів, що послідувало в роки після успішного встановлення структури L-аскорбінової кислоти, дозволило більш глибоко проникнути в структуру молекули.

1.3.1 Дифракція рентгенівського випромінювання

Вперше рентгеноструктурний аналіз L-аскорбінової кислоти був виконаний ще на початку 30-х рр. з метою допомогти структурним дослідженням, проведеним у Бірмінгемі, і фактично підтвердив висновки бірмінгемській групи. У 60-і рр. в роботі Хвослефа з Осло, виконаної за допомогою методів рентгенівської та нейтронної дифракції, було виявлено, що кристали аскорбінової кислоти відносяться до моноклінної просторової групі з чотирма молекулами в елементарній комірці. У кристалі існує два типи молекул (А і В) з вісьмома міжмолекулярними водневими зв'язками (рис. 3.7).

Конформації молекул А і В фактично ідентичні в тому сенсі, що в обох випадках С-5-ОН розташована антіперіпланарно щодо С-4-Н та С-6-ОН (рис. 3.8). Солі L-аскорбінової кислоти містять резонансно-стабілізований аскорбатний аніон, що утворюється при депротонування

С-3-ОН. Рентгеноструктурні дані підтверджують очікувана зміна довжини зв'язків в ко?югірованной системі аніону О-С-3 = С-2-С-1 = О в порівнянні з нейтральною молекулою (табл. 3.2).

У багатьох солях аскорбінової кислоти сумарний ефект координованого іона металу і водневого зв'язування призводить до того, що С-6-ОН знаходиться в синклинальной (або гош)

орієнтації щодо С-5-ОН.

1.3.2 Ультрафіолетова спектроскопія

УФ-спектр L-аскорбінової кислоти при рН 2 має максимум поглинання при 243 нм (е = 10 000 моль ~ 1дм3см ~ 1), який при рН 7,0 зсувається в червону область до 265 нм (е = 16 500моль_дм3см ~ 1) за рахунок депротонування С-3-ОН групи.

Ці зміни відповідають ? > ? * електронному переходу в сполученої подвійний вуглець-вуглецевого зв'язку п'ятичленного лактонного кільця.

1.3.3 Інфрачервона спектроскопія

В ІЧ-спектрі L-аскорбінової кислоти є ряд цікавих

максимумів поглинання. (рис.3.9)

Особливий інтерес представляє область валентних коливань

О-Н від 4000 до 2000 см-1 (рис.3.10).

Так як довжини водневих зв'язків (і відповідно міцність) в кристалі відомі, можна провести кореляцію цих максимумів поглинання і характеристичних валентних коливань ОН-груп, що беруть участь в утворенні водневих зв'язків. Очевидно, що чотири виразних піку в високочастотному крилі спектра відповідають спиртовим ОН-групами при С-5 і С-6 бічного ланцюга (табл. 3.3).

Енольними гідроксили при С-2 і С-3 беруть участь в утворенні більш міцних водневих зв'язків з укороченим відстанню О-О (0,261-0,267 нм), що виражається у вигляді складної серії розширених смуг в області 3100-2200см-1, відповідних молекулам А і В. Безсумнівно, пік з максимумом поглинання 2915 см-1вблізі високочастотного крила спектру є наслідком накладення сигналів валентних коливань С-Н. Що стосується низькочастотних сигналів, сильне поглинання при 1754 см-1бил віднесено за рахунок валентних коливань групи С = О п'ятичленного лактонного кільця, а інтенсивний дублет при 1675 і 1660 см-1-за рахунок валентних коливань групи С = С (на які накладаються коливання уздовж всій пов'язаною системи). Сигнал при 1460 см-1пріпісан ножичним коливанням групи СН2.

Незважаючи на складність області характеристичних коливань, були зроблені спроби провести їх кореляції, наприклад:

смуга при 1320 см-1пріпісана деформації С-2-ОН, смуга при 1275 см-1-коливанням С-2-О, смуга при 1140 см-1-коливанням С-5-О і смуги при 1025/990 см-1- деформації лактонного кільця.

1.3.4 Спектроскопія ядерного магнітного резонансу

У спектре13С ЯМР L-аскорбінової кислоти при повному придушенні спін-спінової взаємодії з протонами, як і очікувалося, з'явилися сигналів, які були співвіднесені з конкретними атомами молекули (рис. 3.11).

Неповне придушення спін-спінової взаємодії з протонами призводить до очікуваного розщеплення сигналів, т. Е. С-1, С-2 і С-3 (синглети), С-4 і С-5 (дуплети) і С-6 (триплет) . Сигнали С-4 і С-5 вдалося диференціювати після того, як був отриманий спектр при повному придушенні спін-спінової взаємодії з протонами похідного, дейтерированного по положенню 4, де сигнал при 77? м. Д. Став кодонів внаслідок спін-спінової взаємодії з дейтерієм . Сигнал С-3 був ідентифікований завдяки його великому (19? м. Д.) Слабопольному зрушенню при зміні рН від 2 до 7, що призводить до депротонування С-3-ОН. Особливо цікавий спектр1Н ЯМР L-аскорбінової кислоти, так як його ретельний аналіз дозволяє визначити конформацию молекули у водному розчині. При знятті спектру в D2O чотири протона ОН-груп заміщуються на дейтерій і не проявляються у вигляді сигналів. Інші чотири протона (Н-6, Н-6 ', Н-5 і Н-4) утворюють систему АВМХ, причому протони при С-6 нееквівалентний через хиральности атома С-5.

Тонка структура цих сигналів не проявляється в низьких магмагнітних полях (60 або 100 МГц), але вище 300 МГц виявляється спін-спінова взаємодія, яка не є взаємодією першого порядку. Це розщеплення особливо помітно в спектре1Н ЯМР аскорбата натрію (рис. 3.12).

Значення констант спін-спінової взаємодії J, отримані з таких спектрів, дозволяють визначити переважну конформацію L-аскорбінової кислоти у водному розчині. Наприклад, знайдено, що Jh4, H5составляет 1,8 Гц. Це відповідає передвіщеному значенням для конформації, зображеної на рис. 3.13. Таким чином, переважна конформація навколо зв'язку С-4-С-5 у водному розчині така ж, як і в кристалі (рис. 3.8).

В рівній мірі інформативна кореляція констант спін-спінової взаємодії з конформацией навколо зв'язку С-5-С-6.

Можливі стабільні конформери представлені на рис. 3.14. Припустивши, що спостережувані константи спін-спінової взаємодії є ваговим усреднением теоретичних величин для трьох конформеров, можна обчислити їх населеність (табл. 3.4). І знову краща конформація навколо зв'язку С-5-С-6 в розчині ідентична виявленої в кристалі. Подібність переважних конформацій бічних ланцюгів в кристалічній решітці і в розчині пояснюється, можливо, відсутністю в обох випадках внутрішньомолекулярних водневих зв'язків. Але, звичайно, міцні міжмолекулярні водневі зв'язки утворюються між сусідніми молекулами аскорбінової кислоти в кристалі і з молекулами води у водному оточенні.

1.3.5Масс-спектрометрія

У мас-спектрі L-аскорбінової кислоти, зафіксованому при іонізації молекули під дією електронного удару, мається інтенсивний пік з m / е 116 поряд з піком молекулярного іона (m / е 176) (рис. 3.15). Було висловлено припущення, що фрагментація відбувається за рахунок відщеплення бічного ланцюга з подальшим руйнуванням кільця, що відповідає наявності найбільш інтенсивних сигналів (рис. 3.16).

2 Хімічні властивості l-аскорбінової кислоти

Деякі перетворення L-аскорбінової кислоти вже згадувалися в розділі, присвяченому встановленню структури молекули.

Ці та інші реакції будуть детально розглянуті в наступних розділах.

2.1 Алкилирование і ацилирование

Як і у багатьох вуглеводів, первинний гідроксил при С-6 L-аскорбінової кислоти легко піддається тріфенілметілірованію (трітілірованію) під дією тріфенілхлорметана в піридині (рис. 4.8).

Метилювання L-аскорбінової кислоти діазометаном проливає світло на таутомерну природу вітаміну. Підвищена кислотність гідроксилу при С-3 дозволяє відтитрувати його діазометаном в ефірі; при цьому утворюється

3-О-метіласкорбіновая кислота. Реакція супроводжується утворенням невеликих кількостей 1-метил-?-L-аскорбінової кислоти внаслідок присутності мінорних кількостей таутомерію. Обидва з'єднання піддаються подальшому етілірованію діазометаном, даючи 2,3-ді-О-метил-L-аскорбінову і 1,2-ді-O-метил ?-L-аскорбінову кислоту відповідно (рис. 4.9)

Під дією лугу з подальшим подкислением 2,3-ді-О-метильних похідне зазнає цікаву ланцюг перетворень. Утворюється не простий моноциклічний лактон, а бициклических похідне з єдиним вільним гідроксилом - 2,3-ізодіметіл-L-аскорбінова кислота. Кислотний гідроліз цього продукту призводить до 3-О-метил-L-аскорбінової кислоти, яка також виходить при стоянні на холоду водного розчину 1,2-ді- O-метил ?-L- аскорбінової кислоти, що супроводжується втратою лабильного метильного залишку при С-1. Як і слід було очікувати, 3-O-метил-L-аскорбінова кислота легко метіліруется під дією діазометана в ефірі, утворюючи 2,3-ді-О-метиловані похідне. Описані перетворення підсумовані на рис. .10.

2,3-Ді-О-метил-L-аскорбінова кислота може бути піддана подальшому метилированию іодметаном в присутності оксиду срібла з утворенням 2,3,5,6-тетра-О-метилованого продукту, а також трітілірованію первинної спиртової групи при С- 6. Метилування з подальшим зняттям трітільной захисної угруповання в кислому середовищі приводить до 2,3,5-три-О-метильних похідному (рис. 4.11), яке, як було показано, бере участь в ланцюзі перетворень, ідентичних наведеним на рис. 4.10, і перетворюється на бициклических 2,3,5-ізотріметільное похідне.

Катализируемая кислотами етерифікація аскорбінової кислоти, наприклад ацетилювання, спочатку призводить до утворення О-6-ацильного похідного, а в більш жорстких умовах - до 5,6-діефір. Кристалічний 5,6-діацетат добре відомий; отримання 2,3,4,6-тетраацетата вимагає ще більш жорстких умов.

У лужних умовах електрофільне атака алкилірующих і ацілірующіх агентів залежить від кислотності і стерическое доступності гідроксильних груп при С-2, С-3, С-5 і С-6. Найбільш кислим є атом водню гідроксилу при С-3 (рКа = 4,25), але делокалізація негативного заряду у відповідному аніоні знижує його реакційну здатність і призводить до виникнення подвійної природи, яка виражається в тому, що алкилироваться може не тільки положення О-3 , але і положення С-2. В результаті селективна модифікація положення О-3 утруднена, і добитися її можна тільки за допомогою таких сильних алкилірующих і ацілірующіх агентів, як діазометан і хлорангідріди.

Втрата другого протона гідроксилом при С-2 (рКа = 11,79) призводить до утворення діаніона, який селективно алкілуючі і ацилирующей по тому становищу (рис. 4.12).

Подібний підхід можна використовувати при синтезі 2-О-неорганічних ефірів, наприклад 2-О-сульфату. Якщо захищені обидва гідроксилу при С-2 і С-3, то в присутності основи модифікується більш доступна стерически первинна спиртова група при С-6 і останню чергу - при С-5 (рис. 4.13).

2.2 Освіта ацеталей і кеталей

Каталізуються кислотами освіту ацеталей і кеталей аскорбінової кислоти застосовується для специфічного захисту одночасно двох гідроксильних груп в процесі структурної модифікації. Такі 5,6-О-похідні, як ізопропіліденкеталь і бензіліденацеталь, добре відомі, а нещодавно з'явилася можливість селективно захищати гідроксильні групи при

С-2 і С-3 за допомогою реакційноздатних альдегідів (рис. 4.14).

Ці нові реакції відкрили шлях до селективного модифікуванню як первинних, так і вторинних спиртових груп молекули аскорбінової кислоти.

2.3 Окислення

L-Аскорбінова кислота є сильним відновником у водному розчині, проте в безводному середовищі це не так очевидно. Перша стадія окислення легко оборотна і призводить до утворення дегидроаскорбиновой кислоти, структура і властивості якої будуть розглянуті в наступному розділі. Дегидроаскорбиновая кислота також здатна бути відновником особливо в лужних умовах і при окислюванні гіпоіодіт-іоном або молекулярним

киснем розпадається на L-треонін і щавлеву кислоту. Ця реакція фрагментації виявилася дуже корисною при встановленні структури вітаміну С. Аналогічна фрагментація відбувається також при обробці пероксидом водню в лужному середовищі або перманганатом калію в кислому або лужному середовищі, причому крім вищеназваних продуктів детектується ще й ряд інших.

Швидкість аеробного окислення аскорбінової кислоти залежить від рН розчину, досягав максимуму при рН 5 і 11,5. Однак найбільш швидко і повно фрагментація протікає в лужному середовищі. Окислительное розщеплення відбувається і в анаеробних умовах, хоча і повільніше.

Ультрафіолетове, рентгенівське і гамма-випромінювання ініціюють фотохімічні окислення аскорбінової кислоти у водних розчинах по свободнорадикальному механізму як в аеробних, так і в анаеробних умовах.

Окислення первинної та вторинної спиртових груп аскорбінової кислоти при С-5 і С-6 може теоретично призводити до утворення ряду побічних продуктів. Отримання таких похідних безпосередньо з L-аскорбінової кислоти вимагає селективного захисту гидроксилов при С-2 і С-3. На рис. 4.15 наведені приклади сполук такого типу, які вдалося виділити.

2.4 Дезоксісоедіненія

Похідні L-аскорбінової кислоти, у яких один або більше гидроксилов при С-2, С-3, С-5 або С-6 заміщені на атом водню, відомі як дезоксісоедіненія. Нестабільність вітаміну С підігріває інтерес до його більш стабільним аналогам за умови збереження ними антіскорбутного дії.

Відомо, що 6-дезокси-L-аскорбінова і L-рамноаскорбіновая кислоти (рис. 4.16) зберігають відповідно 30 і 20% антіскорбутного активності вітаміну С. В останні роки були синтезовані ще деякі з'єднання такого типу (рис. 4.17). Обнадіює, що 6-хлор-6-дезоксіпроізводное володіє підвищеною термічною стабільністю в порівнянні з вітаміном С і в той же час володіє помітною антицинготну активністю.

3. Біохімія вітаміну з

Ефективність вітаміну в загоєнні ран і здатність прискорювати ріст пов'язані з його участю в синтезі волокнистих сполучних тканин, особливо в прискоренні посттрансляційних гидроксилирования залишків проліну і лізину колагену - найпоширенішого білка тваринного світу. Цей процес, все ще далекий від того, щоб бути повністю зрозумілим, в ході якого, як це не парадоксально, відновні властивості аскорбінової кислоти необхідні для окислення пролина і лізину, буде головною темою цього розділу. Хоча, звичайно, цим роль аскорбінової кислоти аж ніяк не обмежується. Починаючи з перших років становлення біохімії вітаміну С, що ознаменувалися суперечками навколо його відкриття, а також навколо ролі в метаболізмі амінокислот, сфера впливу цього з'єднання все більше розширювалася, охоплюючи різні аспекти імунології, онкології, процесів травлення і всмоктування, ендокринології, нейрології, детоксикації та профілактики катаракти.

Серед вищих організмів лише дуже небагато не здатні до біосинтезу вітаміну С. До них відноситься і Homo sapiens, тому не дивно, що більша частина з того, що відомо про біохімію L-аскорбінової кислоти, має відношення до ссавців.

3.1 Біосинтез

Більшість живих організмів можуть перетворювати D-глюкозу в L-аскорбінову кислоту. Важливо ясно розуміти, що це перетворення відбувається не через епімерізацію, а через формальний поворот в площині на 180 ° сполуки D-ряду, в результаті чого утворюється сполука, що належить до L-ряду. Слід пам'ятати, що представлене на рис. 5.2 зображення ациклической форми D-глюкози, відноситься до D-ряду, так як гідроксильна група у передостаннього атома вуглецю (в даному випадку С-5) розташована праворуч від нього.

Захистивши попередньо реакционноспособную альдегідну групу по С-1, можна окислити D-глюкозу поположеніюС-6, отримавши D-глюкуронової кислоти (рис. 5.3).

Якщо тепер С-1 альдегідну групу відновити до первинного гідроксилу, ми отримаємо з'єднання, структура якого наведена на рис. 5.4.

Найбільш важлива функціональна угруповання (в даному випадку карбоксильная при С-6) звичайно розташовується у верхній частині зображення, а відповідного атома вуглецю присвоюється номер С-1. Отже, якщо повернути аркуш паперу на 180 ° або перевернути зображення в площині, ми по-

отримаємо з'єднання L-ряду - похідне альдогексози L-гулози, зване L-гулонової кислотою (рис. 5.5). Наступні циклизация і окислення призводять до утворення L-аскорбінової кислоти.

Вважається, що всі хлорофіллсодержащіе рослини і проростають насіння можуть синтезувати аскорбінову кислоту згідно зі схемою, наведеною на рис. 5.8.

Згідно з деякими джерелами, у рослин більш важлива ланцюг перетворень за участю D-галактуроновой кислоти, в результаті якої після відновлення та замикання лактонного кільця замість L-гулонолактона утворюється L-галактуронолактон, також перетворюється на L-аскорбінову кислоту. Попередником D-галактуроновой кислоти є, очевидно, D-галактоза - вуглевод, виявлений у ссавців і не знайдений принаймні в значних кількостях у рослин. Тому важко припускати, що цей процес може бути важливим. Проте незалежно від того, чи є вихідним з'єднанням D-глюкоза або D-галактоза, біосинтез L-аскорбінової кислоти відбувається через інверсію. Однак цьому суперечать експериментальні дані, що свідчать про те, що у деяких рослин, наприклад у созревающей полуниці, перетворення D-глюкози в L-аскорбінову кислоту здійснюється не через інверсію. Якщо використовувати D-глюкозу, мічену тритієм (3Н) по положенню С-6, в утворюється L-аскорбінової кислоти міченим виявляється також положення С-6. Результати геноінженерний роботи, в якій була отримана експресія гена ферменту редуктази Corynebacterium в бактеріях Erwinia herbicola, демонструють наявність у ланцюзі перетворень ще двох проміжних сполук - D-глюконової і 2,5-дікетоглюконовой кислот. У цьому випадку немає необхідності в інверсії, щоб пояснити, яким чином D-глюкоза трансформується в L-аскорбінову кислоту. Очевидно, слід припустити, що одні рослини продукують L-гулонової кислоту через D-глюкуронової або D-гaлактуроновую кислоти, тоді як у інших процес протікає через освіту d-глюконової і 2,5-дікетоглюконовой кислот і не вимагає інверсії.

Велика частина досліджень по синтезу аскорбінової кислоти

у тварин була виконана на лабораторних щурах, і результати підтвердили ідею про повну С-1 / С-6 інверсії між D-глюкуронати і L-гулонатом. Більшість представників земної фауни здатні біосінтезіровать L-аскорбінову кислоту з d-глюкози через проміжні сполуки - D-глюкуронової кислоти, L-гулонової кислоту, L-гулонолактон і 2-кето-L-гулонолактон. Виняток становлять примати (включаючи і Homo sapiens) і деякі інші ссавці, а також риби, комахи і деякі види птахів. Залишається лише гадати, чому ці представники тваринного світу втратили здатність до біосинтезу аскорбінової кислоти. Мабуть, їхні далекі предки позбулися генетичного матеріалу, необхідного для синтезу ферменту L-гулонолактоноксідази, що і заблокувало завершальну стадію в ланцюзі перетворень. Вважають, що ця прикра помилка сталася 25 мільйонів років тому і саме вона привела до того, що людина ділить безсумнівні труднощі

свого становища з іншими приматами, морськими свинками, індійськими криланами, деякими видами птахів, включаючи дрозда з екзотичним голосом; рибами і деякими видами комах, включаючи мешкає в пустелі сарану, тутового шовкопряда і жуків Anthonomus. Можливо, що у всіх травоїдних комах (поедающих зелені рослини) існує потреба в надходженні вітаміну С з їжею. Виведення його з раціону, наприклад, сарани призводить до абортивній линьки і смерті. У тих представників тваринного світу, які здатні самообеспечивающейся себе аскорбіновою кислотою, її біосинтез здійснюється в печінці (ссавці) або нирках (птахи, рептилії, амфібії).

3.2 Вітамін С в продуктах харчування

Homo sapiens цілком залежить від надходження вітаміну С з їжею. Єдиним тваринам продуктом, що містить значні кількості вітаміну С, є молоко (1-5 мг / 100г); міститься він також і в печінці. Найбагатші джерела аскорбінової кислоти - це свіжі овочі та фрукти (особливо цитрусові, томати і зелений перець), печена картопля (17 мг / 100 г)

і листові овочі. Дуже багаті вітаміном С гуава (300 мг / 100 г) і чорна смородина (200 мг / 100 г), але вони не надто поширені в західних країнах. У табл. 5.1 наведені вичерпні дані про зміст вітаміну С в найбільш уживаних овочах і фруктах.

Відомо, що кулінарна обробка овочів і фруктів часто спричиняє за собою втрати аскорбінової кислоти. Так, при подрібненні продуктів значно зростає ферментативна активність аскорбатоксідази, що міститься в рослинах, багатих вітаміном С. Цей фермент присутній у всіх рослинних тканинах і зазвичай або неактивний, або міститься всередині візікули. Інший фермент, що обумовлює втрату аскорбінової кислоти, фенолаза, каталізує окислення поліфенольних сполук киснем повітря, за рахунок чого відбувається потемніння таких фруктів, як яблука. При наявності аскорбінової кислоти фермент відновлює о-хінони знову до про-дифенол. Процес супроводжується утворенням дегидроаскорбиновой кислоти, яка швидко перетворюється в 2,3-дикетогулонову кислоту, і

каталізується іонами Cu (II) та інших перехідних металів. Саме тому не рекомендується готувати овочі та фрукти в мідної та залізної посуді. І, звичайно, основним фактором, що впливає на втрату вітаміну С в процесі приготування їжі, є просто його розчинення у воді. Дослідження швидкості руйнування вітаміну С при кулінарній обробці, виконані на модельних системах, привели до припущення, що це процес першого порядку. Вплив температури на швидкість розпаду вітаміну С адекватно описується рівнянням Арреніуса, де ? - константа швидкості першого порядку, А - предекспоненціальний множник, Еа - енергія активації, R - газова стала і Т - абсолютна температура:

Як показали результати експериментів, графік залежності lnk від 1 / Т являє собою пряму лінію, що дозволяє обчислити енергію активації. Стандартні величини лежать в межах 80-120 кДж · моль-1. Однак рослини - дуже складні системи, на швидкість розпаду вітаміну С в яких впливають і інші фактори, наприклад мікроорганізми і (або) природні ферменти. Тому енергія активації служить тільки для приблизної оцінки впливу температури на цей процес. Більше того, додатковим параметром є відсутність повітряного середовища. Ситуація ще більше ускладнюється, якщо реакція не

підпорядковується першому порядку. Так, наприклад, є дані, що при зберіганні соків розпад аскорбінової кислоти є процесом нульового порядку. Важко зрозуміти, чому спостерігається таке розходження в кінетиці, однак безсумнівно, що вирішальний вплив на руйнування вітаміну С надає природа системи. Слід зазначити, що овочі, приготовані в мікрохвильовій печі, зберігають набагато більше вітаміну С, ніж приготовані звичайними способами. Це може відбуватися головним чином

завдяки використанню менших обсягів води, хоча повинно позначатися і скорочення часу кулінарної обробки. Таким чином, втрати вітаміну С можна запобігти, не тільки уникаючи тривалого кип'ятіння овочів в мідному посуді, але і якщо готувати їх цілком.

4 Аналітичні аспекти хімії вітаміну з

4.1 Аналітична хімія

Аналіз L-аскорбінової кислоти і її різних форм являє собою певну складність, і навіть сьогодні немає універсального рутинного методу, який був би вільний від недоліків. Будь-який метод аналізу повинен давати можливість одночасно визначати як саму L-аскорбінову кислоту, так і продукти її окислення і знаходити чіткі відмінності між цими сполуками. Крім того, аналітичний метод повинен дозволяти працювати з мінімальними кількостями препаратів. Це, так би мовити, вимоги вищого порядку. Але ситуація ускладнюється тим, що в тваринних і рослинних тканинах вітамін С присутній в оточенні безлічі інших органічних молекул.

Аскорбінову кислоту слід або відокремлювати від них, або використовувати для аналізу якесь унікальне властивість цієї кислоти. Очевидно, що таким унікальною властивістю є її здатність брати участь в окисно-відновних реакціях, що і складає основу багатьох аналітичних методик. Інші методи базуються на визначенні сумарної кількості вітаміну С як в окисленої, так і у відновленій формах. Іноді таке визначення більш переважно, оскільки багато корисні властивості цього з'єднання, використовувані в медицині, притаманні як самої аскорбінової кислоти, так і продуктам її окислення.

4.2 Біологічні методи аналізу

Сьогодні біологічні методи представляють головним чином історичний інтерес. Але насправді їх перевага полягає в тому, що вони засновані на визначенні конкретного профілактичного та лікувального властивості, а саме антіскорбутного активності, властивою і дегидроаскорбиновой кислоті. Біологічні методи вимагають великих витрат часу і коштів і дають широкий розкид результатів, які не завжди надійні. Для проведення біоаналіза використовують морських свинок, так як щури синтезують власний вітамін С. Тварин витримують на штучному раціоні з додаванням різних кількостей вітаміну, потім забивають, а їхні зуби піддають гістологічному аналізу. В результаті встановлюють ступінь захисту від цинги в залежності від кількостей аскорбінової кислоти, що надходить з їжею. Антіскорбутного активність 0,05 мг аскорбінової кислоти прийнята в якості міжнародної одиниці для вимірювання вмісту вітаміну С.

4.3 Титриметричні і колориметрические методи аналізу

Тітріметріческіе методи засновані на використанні відновлювальних властивостей L-аскорбінової кислоти. Зазвичай вона окислюється до дегідроаскорбінової кислоти. У методиці, запропонованій ще в 1927 р, використовується 2,6-дихлорфенолиндофенол або 2,6-ди-хлор-4[(4-гидроксифенил)имино]циклогексадиен-3,5-он-1, який при нейтральних рН дає синє забарвлення, при кислих - рожеву, а при взаємодії з L-аскорбінової кислотою утворює безбарвний продукт. Структура цієї сполуки наведена на рис. 7.1.

Ця реакція лежить в основі найбільш популярного титриметрического методу аналізу вітаміну С. Вона проста у виконанні завдяки легкості визначення кінцевої точки титрування і без праці може бути використана для аналізу розчинів, що містять досить високі концентрації вітаміну С. На жаль, даний метод дуже чутливий до присутності інших восстановителей, з якими вітамін С часто межує в розчинах (діоксид сірки, таніни, іони металів, що відновлюють цукру і т. п.). У кожному конкретному випадку є способи зменшити вплив домішки, але усунути ефект усіх домішкових восстановителей в аналізованому розчині одночасно неможливо. І якщо розчин спочатку пофарбований, це маскує зміна кольору внаслідок реакції; в таких випадках для визначення кінцевої точки використовували різноманітні інструментальні методи, наприклад, полярографії. Було запропоновано багато інших титри реагентів, наприклад, сполуки заліза (Ш). У цьому випадку кінцеву точку визначають при додаванні в якості індикаторів феррозіна, а, а'- діпірідіна або 2,4,6-тріпіріділ-симм-триазина (рис. 7.2).

Вважають, що єдиним продуктом багатьох вивчених окислювально-відновних реакцій L-аскорбінової кислоти є дегидроаскорбиновая кислота. Але часто це не так, і окислення йде далі. Тому розробка точного і чутливого методу визначення концентрації в розчині L-аскорбінової кислоти, дегидроаскорбиновой кислоти і окремих або всіх продуктів подальшого окислення все ще залишається актуальною.

Практичне застосування методу

Кількісне визначення аскорбінової кислоти в мандарині

Виконання роботи:

На аналітичних терезах беруть наважку 5-10г і розтирають у ступці з 15см3HCl. Отриманий екстракт потім фільтрують в колбу об'ємом 50 см3, потім ступку і товкач миють дістілірованой водою і також фільтрують в цю колбу. У 2 конічні колби на 50 см3отбірают аліквоту фільтрату по 5см3,

Додають по 10 см3дістілірованой води і титрують розчином 2,6- ДХФІФ до слаборозовим забарвлення. Титрування проводять не менш 4 разів і визначають середній V 2,6-ДХФІФ.

m = 7,38г

V (ДХФІФ) = 1,2 см3

С (ДХФІФ) = 0,001 М

V (2,6-ДХФІФ) С (2,6-ДХФІФ) М (С6Н8О6) fекв (С6Н8О6) Vк 100

m Va

4.4 Спектрофотометричний аналіз

Водні розчини L-аскорбінової кислоти безбарвні і не поглинають у видимій області спектра, але при нейтральних значеннях рН в спектрі оглощенія спостерігається сильний сигнал при 265 нм. Ця обставина було б дуже зручно використовувати для безпосереднього спектрофотометрического аналізу, але в більшості випадків розчини вітаміну С містять речовини, також поглинають в УФ-області, що в деякій мірі обмежує використання цього методу. Протягом ряду років були сумніви щодо точного значення молярного коефіцієнта екстинкції за 265 нм; в різних роботах давалися значення від 7500 до 16650. Причина таких відмінностей пояснюється швидким окисленням L-аскорбінової кислоти в нейтральних і слабокислих розчинах атмосферним киснем. До тих пір, поки спектри поглинання знімаються в строго анаеробних умовах, неминучі низькі величини, так як поглинання продуктів окислення, при 265 нм незначно.

Складності з'являються при наявності в розчині іонів Сі + та інших перехідних металів, які є потенційними каталізаторами окислення молекулярним киснем. Їх слід видаляти або пов'язувати в комплекс шляхом додавання хелатирующие агента етилендиамінтетраоцетової кислоти. Положення максимуму поглинання залежить від рН і в кислих розчинах зміщується в область 245 нм. На підставі величини поглинання при цій довжині хвилі в розчині соляної кислоти і хлориду калію визначали вміст вітаміну С в безалкогольних напоях і деяких лікарських препаратах, де незначні домішки інших речовин. Часто буває бажано визначити в одному і тому ж розчині зміст дегидроаскорбиновой і L-аскорбінової кислот. Дегидроаскорбиновая кислота поглинає в УФ-області при 220 нм, але величина молярного коефіцієнта екстинкції значно нижчий і становить 720. Таким чином, в цьому випадку чутливість спектрофотометрического аналізу майже в 20 разів менше, ніж у випадку L-аскорбінової кислоти. Пізніше ми побачимо, що цей факт має далекосяжні наслідки при хроматографическом поділі L-аскорбінової та дегидроаскорбиновой кислот.

Для того щоб подолати проблеми, пов'язані з присутністю в тваринних і рослинних тканинах речовин, поглинаючих в УФ-області, проводився пошук реагентів, що дають специфічні кольорові реакції з L-аскорбінової кислотою і (або) продуктами її окислення. Титриметричний метод з використанням дихлорфенолиндофенола, описаний вище, був адаптований для колориметрії. Для спектрофотометрического визначення можна використовувати і забарвлене 2,4-дінітрофенілгідразіновое похідне вітаміну. Виявлено, що це ж саме з'єднання утворюється з дегидроаскорбиновой і 2,3-дикетогулонову кислотами, які є продуктами окислення L-аскорбінової кислоти (рис. 7.3). Ця реакція має широке практичне застосування для визначення вмісту дегидроаскорбиновой кислоти і відома під назвою методу Роу. Він полягає у взаємодії розчину дегидроаскорбиновой кислоти з 2,4-дінітрофенілгідразіном в специфічних умовах при 37 ° С протягом 4 год, в результаті чого утворюється озазон - похідне 2,3-дикетогулонову кислоти. Цю ж реакцію можна використовувати і для визначення вмісту L-аскорбінової кислоти, попередньо окислів її до дегидроаскорбиновой кислоти над активованим вугіллям (норит) розчином брому і т. П. При додаванні до озазону сильної кислоти утворюється розчин червоного кольору, який поглинає при 530 нм.

Основу для колориметрического і спектрофотометрического методів аналізу створює також яскраво-синій колір продукту реакції L-аскорбінової кислоти із з'єднаннями діазонію (рис. 7.4).

Альтернативний підхід полягає у використанні флуоресценції продукту конденсації дегидроаскорбиновой кислоти з о-фенілендіаміном. Опромінення утворюється хіноксаліну на довжині хвилі 350 нм призводить до його флуоресценції при 427 нм. Зазвичай методика включає окислення L-аскорбінової кислоти до дегідроаскорбінової, і потім сумарна кількість визначається спектрофлуорометріческі.

4.5 Електрохімічні методи

Електрохімічні методи надають можливість високоселективного аналізу з високою точністю і відтворюваністю; до того ж вони дуже прості у виконанні. Було запропоновано безліч методик. Наприклад, в таблетках полівітамінів, що містять сполуки Fe'-11- ', вітамін С був проаналізований методом диференціальної пульсуючою вольтамперометрии на скляному вуглецевому електроді. Однак ці методики не знайшли широкого застосування, так як необхідна велика робота по їх

вдосконалення.

4.6 Хроматографічні методи

Хроматографічні методи дають найбільшу надію на подолання основної проблеми, пов'язаної з присутністю в сумішах, що містять вітамін С, безлічі заважають аналізу речовин. Як ми вже бачили, поки не існує методів, що дозволяють чітко і безпосередньо визначати невеликі кількості L-аскорбінової кислоти і (або) продуктів її окислення в присутності будь-яких інших з'єднань. Єдиний задовільний спосіб досягнення специфічності полягає в хромато-

графічному відділенні аналізованих сполук один від одного, а також від інших речовин.

Аж до відносно недавнього часу найбільш часто з хроматографических методів використовували зазвичай газожидкостную хроматографію (ГРХ). Визначити L-аскорбінову кислоту безпосередньо цим методом неможливо через її нелетучесті. Для того щоб мати таку можливість, була розроблена тривала процедура перетворення L-аскорбінової кислоти в летючий тріметілсіліловий ефір. Такий метод дозволяє отримувати точні та відтворювані результати, але через тривалість попередньої підготовки зразка він не так зручний, як розроблений недавно метод високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ). В даний час ВЕРХ стала альтернативним способом швидкого визначення найрізноманітніших органічних і неорганічних сполук. Вона часто знаходить застосування у фармацевтичній промисловості для аналізу болезаспокійливих і інших препаратів. ВЕРХ давно використовується і для аналізу вітамінів.

Однак це не вирішує всіх проблем у разі визначення вітаміну С. Залишається ще багато складнощів, і метод не завжди вдається використовувати з однаковою легкістю як для аналізу усього розмаїття зразків, так і для визначення малих концентрацій.

Однак, коли застосування методу ВЕРХ можливо, він зазвичай дає надійні, точні та відтворювані результати. Питання кількісного визначення розділених речовин в ВЕРХ вимагає наявності специфічного фізичного властивості у вітаміну С (як у L-аскорбінової кислоти, так і в продуктів її окислення). До часу написання цієї книги найбільш широке

поширення набули детектори, що вимірювали поглинання в УФ-або видимій області спектра. Вони дозволяють визначати нанограммових кількості L-аскорбінової кислоти, але при визначенні дегидроаскорбиновой кислоти їх чутливість набагато нижче через значно нижчого молярного коефіцієнта екстинкції (див. Вище). Залишається перевірити, чи не можна підвищити

ефективність аналізу, використовуючи детектори іншого типу, чутливі до маси. Для ВЕРХ зазвичай використовують колонку з дрібнопористі полімерним обратнофазовим сорбентом з розвиненою поверхнею, таким, як, наприклад, PLRS-s 100A, при низьких значеннях рН водної рухомої фази. Для цього підходить 0,2 М розчин NaH2PO4, який створює рН близько 2,1, а також пригнічує дію іонів металів і дає добре забуферений рухливу фазу. Такий метод був використаний для визначення вмісту L-аскорбінової кислоти та продуктів її окислення у фруктових соках. В даному середовищі УФ-спектрофотометричний детектор, реєструючий поглинання при 220 нм (при цій довжині хвилі обидва сполуки мають близькі молярні коефіцієнти екстинкції), має задовільну чутливість. Типова хроматограмма наведена на рис. 7.6.

З неї випливає, що цим методом розділяються не тільки L-аскорбінова і дегидроаскорбиновая кислоти, а й продукти їх подальшого окислення, відповідні оторая піки також присутні на хроматограмі. Це одна з багатьох методик з використанням ВЕРХ, придатних для проведення подібного аналізу.

4.7 Неорганічна хімія

Цей розділ буде присвячений головним чином реакцій L-аскорбінової кислоти з іонами металів та їх комплексами. Однак було б недоречно обговорювати цю тему без розгляду властивостей з'єднання, яке в буквальному сенсі "зазіхає" на всю неорганічну хімію. Отже, сюди важливо включити розгляд досить складного хімізму окисно-відновних реакцій вітаміну С, а також інформацію про кількісний і якісний визначенні та властивостях сполук, які часто фігурують як проміжні продукти таких реакцій, а саме аскорбат-радикалів.

5. Статистична обробка результатів аналізу

Метод виключення грубих промахів по Q-критерієм

Метод полягає в розрахунку величини Q: Q = (x1 - x2) / R, де x1 - можливий промах ізмеренійx2 - результат вимірювання, найближчий за значенням до х1R - розмах варіювання, тобто різниця між найбільшим і найменшим значеннями. Якщо Q Qтаб - результат відкидається

Для визначення похибки титрування слід провести ста статистично обробку вибраних даних. Стандартне відхилення:

Похибка титрування:

Література

1. М. Девіс, Дж. Остін, Д. Патрідж «Вітамін С. Хімія і біохімія», Москва «Мир» 1999
Динаміка сімейно-шлюбних орієнтацій в сучасному суспільстві
Федеральне агентство за освітою Російській Федерації Пермський Державний Технічний Університет Кафедра соціології і політології Курсова робота по курсу Загальна соціологія Динаміка сімейно-шлюбних орієнтацій в сучасному суспільстві Виконав: студент 2 курсу гр. З-09-2 Нікулін Олександр

Шпаргалки з географії промисловості
Квиток 1. 1. Функц. і стр-рные особливості вузлів доб. і обрабат. пр-ти. Суть проблеми пром. вузла зводиться до створення комплексу пр-ий, об'єднаних спільністю тр. положення, спільним исп-ием одних і тих же обслуговуючих пристроїв або инфрастр-ры і взаємних пр-ными і пр-технологич. зв'язками.

Волоконна оптика та її застосування
Міністерство освіти і науки України Дніпропетровський національний університет імені Олеся Гончара Центр заочної та дистанційної освіти Спеціальність «Біологія» Індивідуальне завдання з фізики на тему: «Волоконна оптика та її застосування» Виконала: студентка групи 09-1з (1 потік) Литвиненко

Транспорт у Східному Казахстані
Введення Транспорт є важливим елементом у розвитку економіки області. Його діяльність нерозривно пов'язана із зміною обсягів випущеної промислової і сільськогосподарської продукції, товарообігу споживчих товарів. На діаграмі представлена динаміка індексу фізичного обсягу виробленої продукції

Види та властивості сприйняття
Види та властивості сприйняття Сприйняття (сприймання) - це психічний процес відображення предметів і явищ дійсності в сукупності їх властивостей і частин за безпосередньої дії на органи чуття з розумінням цілісності відображуваного. Сприйняття можуть бути: повними і неповними; глибокими

Арматурна сталь і металоконструкції
Зміст 1. Класифікація і сортамент 2. Технічні вимоги 3. Приймання 4. Маркування 5. Упаковка 6. Транспортування і зберігання 7. Ефективне використання різних класів сталевої арматури в областях будівництва 7.1 Арматура-застосування, сьогоднішнє становище на ринку арматури в Росії 7.2 Види арматури

Вплив метрологічних і космічних факторів на здоров'я людей
Державна установа освіти «ДОВСКАЯ ГІМНАЗІЯ» Навчально-дослідна робота Вплив метрологічних і космічних факторів на здоров'я людей Довск ЗМІСТ Введення Методи і методика роботи Теоретична частина Практична частина Висновок і висновки Список літератури ВСТУП Багатьом доводиться неодноразово чути

© 2014-2022  8ref.com - українські реферати