Головна
Банківська справа  |  БЖД  |  Біографії  |  Біологія  |  Біохімія  |  Ботаніка та с/г  |  Будівництво  |  Військова кафедра  |  Географія  |  Геологія  |  Екологія  |  Економіка  |  Етика  |  Журналістика  |  Історія техніки  |  Історія  |  Комунікації  |  Кулінарія  |  Культурологія  |  Література  |  Маркетинг  |  Математика  |  Медицина  |  Менеджмент  |  Мистецтво  |  Моделювання  |  Музика  |  Наука і техніка  |  Педагогіка  |  Підприємництво  |  Політекономія  |  Промисловість  |  Психологія, педагогіка  |  Психологія  |  Радіоелектроніка  |  Реклама  |  Релігія  |  Різне  |  Сексологія  |  Соціологія  |  Спорт  |  Технологія  |  Транспорт  |  Фізика  |  Філософія  |  Фінанси  |  Фінансові науки  |  Хімія

Методи діагностики та профілактики мікробної контамінації при трансплантації ембріонів - Ботаніка та сільське господарство

Зміст Вступ 1. Огляд літератури 1.1 Стан та перспективи застосування методу трансплантації ембріонів 1.2 Чутливість матки до інфекцій в різні періоди статевого циклу 1.3 Попередження занесення інфекції в матку при витяганні та пересадці ембріонів 1.4 Вплив мікроорганізмів на спермії, яйцеклітини і ембріони 1.5 Вплив антибіотиків на спермії, яйцеклітини , ембріони 2. Власні дослідження 2.1 Мета і завдання 2.2 Матеріали і методика досліджень 2.2.1 Підготовка лабораторії, посуду та інструментів для маніпулювання з ембріонами 2.2.2 Підготовка донорів і реципієнтів 2.2.3 Витяг і підготовка ембріонів до пересадки 2.2.4 Вплив мікробного фактора на приживляемость ембріонів 2.3 Аналіз економічної діяльності підприємства 2.4 Характеристика підприємства 2.5 Результати досліджень 2.5.1 Розробка заходів попередження мікробної контамінації ембріонів на технологічних етапах їх підготовки 2.5.2 Економічна ефективність ветеринарних заходів 2.6 Обговорення результатів власних досліджень 3. Охорона праці 3.1 Організація охорони праці 3.2 Виробнича санітарія 3.3 Пожежна безпека Висновки і пропозиції Висновки Пропозиції виробництву Список літератури

Введення

Сучасні темпи розвитку тваринництва потребують удосконалення існуючих методів селекційної роботи з метою створення і прискореного розмноження високопродуктивних тварин (А.П. Студенцов та ін. 2000). Більш інтенсивне використання репродуктивного потенціалу цінних у племінному відношенні жіночих особин можливо при трансплантації ембріонів.

Однією з головних умов успішного застосування методу трансплантації ембріонів у тваринництві є асептичність проведених операцій (A. Brand et al., 1978; H. Kupferschmid; 1984 E. Singh, 1985; А. Овчинников, 1985; Ф.І. Осташко та співавт. , 1986).

У технології трансплантації ембріонів важливе місце відводиться розробці методів, що попереджають можливість контамінації їх патогенною мікрофлорою, які забезпечують отримання здорових телят і профилактируют поява гінекологічних хвороб, зокрема, ендометритів як у корів - донорів, так і у реципієнтів.

При маніпулюванні з ембріонами поза організмом не можна допускати їх інфікування та перенесення мікроорганізмів у матку реципієнта (M. Tibier, 1985; I. Atwell, 1987). Бактеріального забруднення ембріони піддані і при їх оцінці. Багато авторів стверджують, що як яйцеклітина, так і ембріон з інтактною зоною пеллюціда надійно захищені від мікробного фактора, тим не менш, деякі з них рекомендують багаторазове відмивання ембріонів в стерильних буферних середовищах або в середовищах з додаванням ферментів (RA Bowen et al., 1983 ; E. Singh et al., 1982; 1983; W. Hare et al., 1984). Саме тому керівництвом міжнародного товариства з пересадки ембріонів (Manual of the international embryo transfer, 1986) передбачений санітарний контроль їх якості.

У нашій країні і за кордоном ведуться інтенсивні роботи з розробки оптимальних способів трансплантації ембріонів великої рогатої худоби. Тривають дослідження з удосконалення гігієнічних і технічних прийомів отримання та пересадки ембріонів.

Аналіз літературних даних показав доцільність досліджень з удосконалення гігієнічних прийомів при трансплантації ембріонів. Це продиктовано недостатньою кількістю суперечливих даних про вплив мікроорганізмів на пріжівлямость ембріонів. Існує думка, що внесення інфекції в матку з пістолетом Касу не є причиною яловості, якщо в іншому дотримана асептика (A. Brand, 1976; A. Trounson, 1978). Однак, в якості додаткової обережності від можливості внесення вагінальної інфекції в матку реципієнта кембріджські співробітники покривали наконечник пістолета пластиковим чохлом. Інші дослідження А. Бранда показали, що навіть у разі негативної бактеріологічної проби інструменту після нехірургічній трансплантації ембріонів може відбутися вірусне зараження в ході її здійснення (A. Brand, 1978). Воно може бути причиною подальших ускладнень, зокрема, ендометритів. А у корів-донорів, хворих ендометритом, спостерігали часткову або повну дегенерацію ембріонів на різних стадіях їх розвитку, при значному числі незапліднених яйцеклітин (А.Д. Бугров і співавт., 1988). Тому стало необхідним більш детально вивчити питання бактеріальної контамінації статевих шляхів корів і телиць при маніпуляціях вилучення та пересадки ембріонів, вплив її на їх приживляемость, з одного боку, і знайти ефективні антимікробні засоби, з іншого боку.

Метою нашої роботи була розробка методів профілактики і санітарного контролю технологічних процесів при трансплантації ембріонів у великої рогатої худоби.

Для досягнення цієї мети нами поставлені на дозвіл наступні завдання:

1. Вивчити бактеріальну контамінацію статевих шляхів телиць-реципієнтів в фолікулярну і лютеальной фази статевого циклу.

2. Вивчити вплив антибактеріальних препаратів на мікрофлору статевих шляхів після їх санації безпосередньо перед витяганням і пересадкою ембріонів.

3. Провести порівняльну оцінку антибактеріальних препаратів для санації статевих шляхів.

4. Випробувати антибіотики для санації промивних буферних середовищ і відмивання ембріонів.

5. Вивчити вплив випробуваних нами антибактеріальних препаратів на життєздатність і приживляемость ембріонів.

1. Огляд літератури 1.1 Стан та перспективи застосування методу трансплантації ембріонів

Трансплантація ембріонів жіночим особинам порівнянна за можливостями з технікою штучного осіменіння, що дозволяє повніше використовувати генотип видатних самців. Однак широке впровадження цієї перспективної технології стримується недосконалістю методів отримання великого числа зрілих, повноцінних, здатних до запліднення ооцитів (Y. Koinig., 1980), а також порівняно високою трудомісткістю і вартістю робіт (В.В. Мадисон, В.Л. Мадисон, 1988).

У країнах СНД роботи з трансплантації ембріонів великої рогатої худоби розпочаті в 1975 р Перші телята були отримані на початку 1977 (М.І. Прокоф'єв і співавт., 1977) у Всесоюзному НДІ фізіології, біохімії і живлення сільськогосподарських тварин, а перший теля від пересадки замороженого ембріона у Всесоюзному інституті тваринництва в 1980 р З 1983 року організовані чотири центри трансплантації ембріонів: ВИЖ, ВНІІРГЖ, НИИЖ Лісостепу та Полісся. УРСР, Український НДІ розведення і штучного, осіменіння великої рогатої худоби (Н.З. Жильцов, В.В. Мадисон і співавт., 1986). Світова практика пересадки ембріонів успішно розвивається. Застосування методу трансплантації ембріонів безперервно зростає. При цьому технологія технічно вдосконалюється, а ефективність методу зростає (Ф.І. Осташко, 1995; Т.І. Шкіль, 1995; Ф.С. Маусса, 1999; М.Л. Дибиров, 2000).

В даний час найбільш ефективний нехірургічний метод трансплантації ембріонів. В середньому на сучасному рівні біотехнологи одержують із застосуванням пересадки ембріонів близько 10 телят, а в окремих випадках до 50 телят від одного донора в рік, тоді як при звичайному способі розмноження (штучному заплідненні) корова за все життя могла б відтворити 7-8 телят. Тому ідея отримання максимального числа нащадків від кращих за продуктивністю самок здавна привертала увагу дослідників. Вирішення цієї проблеми стало можливим на основі застосування методу трансплантації ембріонів (Ю.Д. Клинский, 1978, 1980; Н.І. Сергєєв, 1979,1984; М.І. Прокоф'єв, 1983).

В останні роки в ряді країн вивчають питання про можливість перенесення заразних хвороб шляхом ембріональної пересадки реципієнтам від корів-донорів. Ряд зарубіжних авторів вважають, що методом трансплантації ембріонів можна успішно вести боротьбу з багатьма інфекційними хворобами. За деякими опублікованими даними окремі інфекції, наприклад, інфекційний ринотрахеїт, вірусна діарея, блутанг, лейкемія великої рогатої худоби реципієнтам з трансплантуються зародком від хворого донора не передаються (RA Bowen et al., 1983; Е. Singh et al., 1983; Z. Pokorny et al., 1983; L. Elizabeth, 1984).

За даними французьких дослідників, вірус лейкозу великої рогатої худоби і вірус катаральної лихоманки при ембріотрансплантаціі не передаються через ембріони з інтактною зоною пеллюціда, якщо їх до пересадки промити розчином трипсину (WC Наге, 1984).

Незважаючи на досягнуті успіхи в розробці прийомів викликання множинної овуляції у корів і телиць-донорів ембріонів, техніці витягу та пересадці зародків, вихід повноцінних ембріонів і їх приживляемость не стабільна.

Багато питань теорії та практики потребують подальшого вивчення та вдосконалення.

Проблемними залишаються питання попередження занесення інфекції в матку при витяганні та пересадці ембріонів.

3.2 Чутливість матки до інфекцій в різні періоди статевого циклу

Здоровий організм ссавців має цілу систему захисних пристосувань, тому діяльність мікроорганізмів-сапрофітів обмежується і не є хвороботворної. У нормі ця мікрофлора відсутня в глибоких відділах статевого тракту самки, що сполучається з черевною порожниною (В.П. Буркат, Г.Г. Харута та ін. 1995; Н.А. Мартиненко, 1971; Е.В. Козловський, П.А . Емельяненко, 1982), хоча в піхву, крім постійно заселяють його молочнокислих паличок, знаходять різні види коків і інші бактерії. Численними дослідженнями встановлено, що в статевих шляхах корів з нормальною і порушеною воспроизводительной функцією часто присутні штами умовно-патогенної мікрофлори: E.coli, Klebsiella, Serritia, Proteus, Pseudomonas (Е.М. Махиня, 1958; DS Sambijal et al., 1986 ; Д.А. Сайко та співавт., 1987), але у більшості тварин під час тічки і полювання мікрофлора гине і змиви, отримані зі слизової оболонки піхви корів, вільні від мікроорганізмів (А.А. Осетров і співавт., 1966). З іншого боку, умовнопатогенна мікрофлора часто потрапляє в статеві шляхи самок зі спермою виробників, використовуваної при штучному заплідненні (С.Л. Семенов, 1955; О.І. Пантюхова, 1961; В.А. Яблонський, 1963; Ф.М. Касумов , 1963; Д.Д. Логвинов, 1968).

Багато вчених займалися вивченням мікробної забрудненості сперми виробників (Качмар О.М .; Авдосьева I.К .; Урус Р.В.), яка застосовується для штучного осіменіння самок, на їх репродуктивну функцію. Більшість з них визнають негативну дію мікробів, що потрапляють в статеві шляхи корів і телиць при штучному заплідненні, на їх відтворну діяльність. В.К. Милованов (1964) стверджує, що причиною ембріональної смертності є неспецифічна мікрофлора, що потрапляє в матку зі спермою. Д.Д. Логвинов (1972) вважає, що прямою причиною зниження якості та запліднюючої здатності сперми, частих абортів, масових затримань посліду, ендометритів, безпліддя, ембріональної смертності і зниження життєздатності новонароджених є рясне мікробне забруднення сперми виробників, застосовуваної для штучного осіменіння самок. Д. Логвинов, В. Плугатирев, В. Кошовий (1972) в 47,9% випадків виділили різні бактерії з навколоплідних вод штучно запліднених корів і в 6% випадків виділили різні бактерії з навколоплідних вод природно запліднених нетелей.

Бактеріологічний метод виділення кампілобактерій зі сперми виробників трудомісткий, тривалий і неефективний через часту контамінації сперми сторонньої мікрофлорою. Відсутність антитіл в спермі тварин не завжди дозволяє зробити висновок про те, що сперма вільна від збудників кампілобактеріозу (Батьківщина В.М., Бондаренко В.З .; Козло В.М .; Скляров О.Д .; Совєткін С.В.) .

Інші автори відзначають відсутність негативного впливу природної контамінації статевих шляхів умовно патогенною мікрофлорою на відтворну функцію корів і пов'язують це з тим, що:

1. Число мікробних тіл цих бактерій, що потрапляють разом зі спермою в матку невелика, воно коливається від 0 до 10 млн. / Мл (Б.Д. Кондратов і співавт., 1976).

2. У процесі еволюції у тварин склалися потужні імунні бар'єри, що перешкоджають інфікуванню статевих шляхів мікрофлорою.

Основними факторами, що забезпечують захист статевих шляхів корів і телиць від умовно патогенної мікрофлори, є: а) Бар'єрні функції слизових оболонок. Так, слизова оболонка шийки матки функціонує як залоза, що виділяє цервікальногослизу, що містить муцини, що володіють біологічно важливими властивостями: абсорбції, бактерицидности, бактеріостатічності (Н.А. Мартиненко, 1971; А.І. Варганов, 1979; В.П. Поліщук, 1984; В.С. Шипілов, 1988). Р. Рафаван і співавт. встановили, що під час тічки відзначається зрушення РН в кислу сторону, що значною мірою запобігає проникнення в порожнину матки через розкриту шийку матки різних мікробів (R. Raghavan et al., 1971, І.Г. Мороз та ін., 2000). Кількість шийного секрету у невагітних корів незначне, але під час вагітності виявляється велике скупчення його в гирлі шийки матки у вигляді слизової пробки, під час полювання слиз малов'язкі, прозора і виділяється у великій кількості (В.С. Шипілов і співавт., 1987; 1988).

б) Активна діяльність полі- і мононуклеарних фагоцитів (І.І. Соколовська, 1973; С.Д. Ватсон, 1985).

в) Наявність системи природних опсонінов і імуноглобулінів (І.І. Соколовська, 1973; О.Д. Ватсон, 1985).

В період тічки під впливом естрогенів відбувається активація як специфічних, так і неспецифічних факторів резистентності (В. Вейнштейн, 1984; С. Ватсон, 1987; С.С. Волков, 1999). При пригніченні імунної реактивності самок мікрофлора здатна викликати порушення пренатального розвитку зародків (Н.Н. Михайлов, 1972).

Крім того, при природному заплідненні корів спермии потрапляють в каудальний відділ шийки матки (А.Г. Нежданов, П.М. Торгун, 1993). Невелика їх частина (близько 0,5%), долаючи бар'єр з слизового секрету, проникає в краніальний відділ цервікального каналу, звідки швидко транспортується до верхівок рогів матки за рахунок антіперістальтіческіе моторики статевого тракту. Описаний механізм сприяє просуванню сперміїв по статевих шляхах, одночасно перешкоджаючи проникненню мікробів (Ф.І. Осташко та співавт., 1972, 1977). При штучному заплідненні сперма впорскується в краниальную частина шийки матки або безпосередньо в матку, минаючи біологічний бар'єр з цервікального секрету. Якщо при цьому сперма містить мікроби, то створюються умови для швидкого обсіменіння ними ендометрію, а, можливо, і порожнини яйцевода. У міру збільшення ступеня мікробної контамінації сперми відсоток плідних осеменений зменшується (В.К. Милованов, 1940, EL Willet, 1951; П.А. Волосків, 1965; Ф.І. Осташко, 1977).

Якщо в період тічки, матка корови стійка до мікробного фактору, то в лютеальной фазу статевого циклу матка корови чутлива до нього. Це довели Л. Роусон із співробітниками (LE Rowson et al., 1953). Вони одну групу корів запліднюють в лютеальной фазу циклу, іншу - в естрального, потім проводили бактеріальну перевірку сперми і змивів з шийки матки. З 11 корів, запліднених в лютеальной фазу циклу, у 8 був Піометра, в однієї - стерильний метрит, в однієї, осіменіння в перший день після полювання, метрита не було, і ще в однієї, осіменіння на третій день після полювання, була пиометра. У спермі були виявлені стафілококи в невеликій кількості. У інших 6 корів, запліднених під час полювання, метрити не спостерігалося, незважаючи на те, що використовувана сперма містила C. Pyogenes.

А.В. Квасницький (1988) у своїй книзі цитує результати експерименту У. Такнасні, де було показано, що введення осеменительную інструменту в матку естрального корови не впливає на її плодючість, але аналогічна маніпуляція в лютеальной фазі циклу знижує стельность реципієнта до 33%, а при введенні інструменту в захисному футлярі в момент проходження піхви, результативність збільшується до 59% (Y. Taknasni, 1981).

М. Крішна і співавтори провели дослідження 106 корів, у яких брали проби слизу з шийки матки в період статевого полювання, від 86 були виділені різні бактерії. Інші автори відзначають, що навіть штучно введена в статеві шляхи самок сільськогосподарських тварин умовно патогенна мікрофлора лизируется протягом декількох діб (M. Krishna et al., 1974, цитата по книзі Н. Михайлова, 1976).

С.А. Фолькель і співавт. внутриматочно вводили Вг.abortus. Змиви з матки і отримані ембріони при дослідженні виявилися вільними від введеного штаму Вг. abortus. У одного тварини, не проявив охоту після суперовуляції в змиві з матки, виявили вводиться штам Вг. Abortus (Voelkel S.A., et al., 1983).

У 16 штучно заражених бруцельоз корів в університеті штату Луїзіана Вг. abortus була відсутня в промивної рідини і гомогенізованих ембріонах (R. Bowen et al., 1983; Е. Singh et al., 1983). Таким чином, було підтверджено, що здорова невагітна матка ціклірующіх корів пригнічує розмноження мікроорганізмів.

П. Шпалюнг повідомляє, що присутність Вг. abortus в невагітних матках носить перехідний характер і пов'язане з бактереміческой фазою. Вона обмежується або відсутній через вплив Еструс (P. Sparling, 1986).

Пейн І.М. і співавт. отримали Вг. abortus шт. 544 в невеликих кількостях з шийки матки 6/6 заражених невагітних телиць протягом 4 міс. після зараження. Це суперечить тезі про те, що мікроорганізми швидко виходять з небеременной матки тварин з нормальним естрального циклу (I. Payne et al., 1960).

Однак, у певних умовах резистентність організму значно слабшає і нормальний кількісний і якісний склад мікрофлори змінюється, а діяльність її активізується. Порушення цілісності захисних покривів шкіри і слизових оболонок також призводить до активізації діяльності сапрофитов, які проникнувши в глиб організму, викликають розвиток в ньому хвороботворного процесу (Н.А. Мартиненко, 1971; Г.В. Звєрєва і співавт., 1987).

З іншого боку, у деяких видів тварин існує певна залежність чутливості до маткових інфекцій від рівня стероїдних гормонів крові. Зокрема, доведено, що матка корови і кролика легко інфікується в лютеальной фазі циклу і стійка до зараження в естрального період (Є. Виллет і співавт., 1951; В. Блек і співавт., 1953; Л. Роусон і співавт., 1953 ; А.В.

Повний текст реферату

Організаційно-економічне обгрунтування раціональної виробничої структури ЗАТ "Істра-Сенежское ППО"
МОСКОВСЬКА ОРДЕНА ЛЕНІНА І ОРДЕНА ТРУДОВОГО ЧЕРВОНОГО ПРАПОРА СІЛЬСЬКОГОСПОДАРСЬКА АКАДЕМІЯ імені К.А. Тімірязєва Кафедра організації сільськогосподарського виробництва Курсовий проект Тема: «Організаційно-економічне обгрунтування раціональної виробничої структури ЗАТ« Істра-Сенежское ППО

Організаційно-економічне обгрунтування розвитку рослинництва
Федеральне державне освітній заклад вищої професійної освіти "Башкирська державний аграрний університет" Агрономічний факультет Спеціальність: Агрономія Форма навчання: Очна Курс, група: 503 Кафедра організація аграрного виробництва Організаційно-економічне обгрунтування розвитку

Народногосподарське значення виробництва овочiв вiдкритого i закритого грунту
ЗМІСТ ВСТУП РОЗДІЛ 1. Народногосподарське значення виробництва овочів відритого і закритого грунту 1.1. Поняття про овочівництво 1.2. Розвиток овочівництва та сегменти ринків овочів в Україні РОЗДІЛ 2. Природно-кліматичні та економічні

Напівінтенсивна технологія вирощування товарної риби за дволітнього циклу в умовах фермерського господарства В.П. Поворозника
Кваліфікаційна робота на тему: "Напівінтенсивна технологія вирощування товарної риби за дволітнього циклу в умовах фермерського господарства В.П. Поворозника" Зміст Завдання на виконання роботи Висновок керівника роботи Рецензія Реферат і ключові слова Вступ 1. Огляд

М'ясні та відгодівельні якості свиней та способи їх визначення
Міністерство сільського господарства Російської Федерації ФГТУ ВПО Уральська державна сільськогосподарська академія Кафедра птахівництва та дрібного тваринництва До У Р З Про У А Я Р А Б Про Т А з дисципліни «свинарство» М'ясні та відгодівельні якості свиней та способи їх визначення. Виконала:

Організаційно-проектувальні та технологічні завдання землеустрою
Міністерство сільського господарства Російської Федерації Федеральне державне освітня установа вищої професійної освіти Державний університет із землеустрою Кафедра землеустрою Звіт про виробничу (переддипломної) практики із землеустрою Москва 2010 Введення Метою виробничої практики є закріплення

Визначення продуктивності вакуум-насоса доїльної установки за допомогою приладів КИ-4840 і КІ-1413
ВГСХА Кафедра технологічного та енергетичного обладнання ЛАБОРАТОРНА РОБОТА № 4 ТЕМА: "ВИЗНАЧЕННЯ ПРОДУКТИВНОСТІ ВАКУУМ-НАСОСА доїльні установки за допомогою приладів КИ-4840 І КІ-1413" Кіров-2008 Мета роботи: Вивчити методику і освоїти техніку визначення продуктивності вакуум-насоса

© 2014-2022  8ref.com - українські реферати